[发明专利]NogoA抗体及其在脊髓损伤中的应用

说明书

本发明涉及生物医学领域，具体而言，涉及一种NogoA抗体及其在脊髓损伤中的应用。本发明所制备得到的NogoA抗体亲和力高，且特异性好，不与NogoB及NogoC发生交叉反应。特别地，该抗体的一个重要优点在于其具有结合并中和NogoA的活性和物理稳定性，因而优选可作为抗体药物使用，其在治疗脊髓损伤中具有优秀的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物医学领域，具体而言，涉及一种NogoA抗体及其在脊髓损伤中的应用。

背景技术

“脊髓损伤”(Spinal Cord Injury)一词是指由创伤(如撞车)、疾病或退化(如癌症)造成的脊髓损坏。目前没有关于全球患病率的可靠估计，但大多是由创伤造成，尽管非创伤性脊髓损伤的比例呈现上升趋势。脊髓损伤的症状取决于损伤的严重程度和受损脊髓的位置。症状可能包括胳膊、腿和/或身体的感觉功能或运动控制部分或完全丧失。最严重的脊髓损伤会影响调节尿便控制、呼吸、心率和血压的身体系统。大多数脊髓损伤者会经历慢性疼痛，脊髓损伤有引发继发性疾病的危险，这些疾病——如深静脉血栓、尿道感染、肌肉痉挛、骨质疏松、褥疮、慢性疼痛和呼吸道并发症，可能导致衰弱，甚至危及生命。急救护理、康复服务和持续的健康维护对预防和管理这些疾病至关重要。其后果是终身性和毁灭性的，不仅给病人造成极大的痛苦，也给家庭和社会带来沉重的负担。

目前认为影响脊髓损伤后再生的不利因素主要有髓鞘相关抑制分子和胶质瘢痕。NogoA又名Reticulon 4，是一种在人类中由RTN4基因编码的蛋白质，该蛋白质已被鉴定为具有中枢神经系统特异的神经沸肌产物的抑制剂。在神经发育过程中，Nogo主要由神经元表达，并为CNS内皮(尖端)细胞的迁移和发芽提供抑制信号，从而限制血管密度。研究表明，在神经元损伤期间阻断NogoA(从多发性硬化症等疾病)将有助于保护或恢复受损的神经元。对于该蛋白质的研究表明了治疗自我免疫介导的脱髓鞘和脊髓损伤再生的巨大潜力。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明涉及一种NogoA抗体或其抗原结合片段，其包含氨基酸序列依次如SEQ IDNO:1～3所示的重链互补决定区CDR-VH1、CDR-VH2、CDR-VH3，以及氨基酸序列依次如SEQ IDNO:4～6所示的轻链互补决定区CDR-VL1、CDR-VL2、CDR-VL3。

在本发明中，“抗体”此技术术语是结合特定抗原的蛋白，其泛指包含CDR区的一切蛋白及蛋白片段，特别是全长抗体。“全长抗体”此用语包括多克隆抗体及单克隆抗体，术语“抗原结合片段”是包含抗体CDR的一部分或全部的物质，其缺乏至少一些存在于全长链中的氨基酸但仍能够特异性结合至抗原。此类片段具生物活性，因为其结合至靶抗原，且可与其他抗原结合分子(包括完整抗体)竞争结合至给定表位。在一些实施方式中，抗体功能片段具有特异性识别并结合NogoA的作用。在一个方面中，此类片段将包含单个重链和单个轻链，或其部分。所述片段可通过重组核酸技术产生，或可通过抗原结合分子(包括完整抗体)的酶裂解或化学裂解产生。

术语“互补性决定区”或“CDR”是指免疫球蛋白的重链和轻链的高度可变区，在本发明中采用Kabat等人所定义(Kabat等人，Sequences of proteins of immunologicalinterest,5th EdUS Department ofHealth and Human Services,NIH,1991,和后来的版本)。有三个重链CDR(HCDR)和三个轻链CDR(LCDR)。此处，取决于情况，术语“CDR”和“CDRs”用于指包含一种或多种或者甚至全部的对抗体与其识别的抗原或表位的结合亲和力起作用的主要氨基酸残基的区域。

可选的，如上所述的NogoA抗体或其抗原结合片段，其包含SEQ ID NO:7所示的重链可变区HCVR和SEQ ID NO:8所示的轻链可变区LCVR。