[发明专利]一种测定特殊医学配方食品中20种游离氨基酸和L-羟脯氨酸的方法在审
申请号: | 202210104499.5 | 申请日: | 2022-01-28 |
公开(公告)号: | CN114441681A | 公开(公告)日: | 2022-05-06 |
发明(设计)人: | 尹丽丽;刘艳明;薛霞;程志;郑红;宿书芳;张艳侠;卢兰香;郑文静;王骏;胡梅 | 申请(专利权)人: | 山东省食品药品检验研究院 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/64 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人: | 王翠翠 |
地址: | 250101 山东省济*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 测定 特殊 医学 配方 食品 20 游离 氨基酸 羟脯氨酸 方法 | ||
1.一种测定特殊医学配方食品中20种游离氨基酸和L-羟脯氨酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)提取:称取均匀样品0.2g于50 mL聚丙烯具塞离心管中,加入25 mL3.5%磺基水杨酸溶液,涡旋1 min,超声15 min,8000 r/min离心5 min,取上清液待衍生;
(2)衍生:分别取标准溶液和样品提取液200μL至15mL离心管,加入衍生缓冲液200μL,混匀后加入400μL1%DNFB衍生试剂,混匀后放入 60℃水浴振荡暗反应10min,取出放至室温,加入平衡缓冲液3mL,混匀后,过0.22μm滤膜后,待上机检测。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,高效液相色谱的条件为:色谱柱:ACQUITYUPLC HSS T3色谱柱,2.1 mm ×100 mm,1.8 μm;流动相: A-50%乙腈水和B- pH5.0的50mmol/L甲酸铵溶液;检测波长:190~600nm;流速:0.3 mL/min;柱温:55℃;进样量:3 µL。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述梯度洗脱程序: A 0~6 min:12%~18%,6~13min:18%~50%,13~28min:50%~65%,28.1~33min:100%保持,33.1min~40:12%保持。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于, PDA检测器采集特征紫外吸收波长360nm、385nm。
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