[发明专利]一种新型多元适体分子在磁珠免疫化学发光AFP中的应用有效
申请号: | 202210105543.4 | 申请日: | 2022-01-28 |
公开(公告)号: | CN114441749B | 公开(公告)日: | 2022-09-30 |
发明(设计)人: | 李松羊;李强 | 申请(专利权)人: | 安源基因科技(上海)有限公司 |
主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;G01N33/543;C07C335/20;C07C331/28;C07C231/02;C07C231/12 |
代理公司: | 苏州三英知识产权代理有限公司 32412 | 代理人: | 朱如松 |
地址: | 200000 上海市浦东新区中国(上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 新型 多元 分子 免疫化学 发光 afp 中的 应用 | ||
本发明公开了一种新型多元适体分子在磁珠免疫化学发光AFP中的应用。其中,多元适体分子通式为:Mag‑NH‑C(S)‑NH‑R1‑L1‑[C(O)‑NH‑Ap1]n,n为正整数且不小于4,Mag‑NH2为氨基磁珠,Ap1为适体分子。通过功能基团增加了适体分子Ap1的数量,通过链长L1增加了适体分子之间的间隔距离。AFP为甲胎蛋白,通过适体分子与检测物质AFP反应,捕获检测物质AFP;同时,通过检测物质AFP的双抗体夹心免疫反应,再次增加对检测物质AFP的信号放大作用,从而,提高检测物AFP的灵敏度。特别提供了新型多元适体分子AP6(n=16)、检测物质AFP、多个抗体标记物等一起共同形成抗原抗体适体磁珠免疫复合物。该适体免疫复合物增加了对检测物质AFP的信号放大作用。
技术领域
本发明是关于生物检测技术,特别是关于一种新型多元适体分子在磁珠免疫化学发光AFP中的应用。
背景技术
目前,抗原抗体免疫反应分为竞争法和夹心法两种。夹心法是双抗体与抗原反应,形成抗原抗体免疫复合物。其中,包被抗体与磁珠交联,形成磁珠包被抗体;标记抗体与标记物交联,形成抗体标记物。磁珠包被抗体,抗原,也就是检测物,与抗体标记物等,一起免疫反应,形成抗原抗体免疫复合物,经过磁分离过程,洗去未结合的抗体标记物,通过抗体标记物与底物的反应,产生光信号强度,其中,光信号强度与检测物T浓度成正比。作光信号强度与校准品浓度的校准曲线,通过检测物的校准曲线求出检测物的浓度。
公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解,而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新型多元适体分子在磁珠免疫化学发光AFP中的应用,尤其适用于磁珠免疫化学发光AFP领域,获得了一种空间位阻和空间构象等得到显著优化的适体分子,从而极大地提高了免疫化学发光AFP的灵敏度。
为实现上述目的,本发明的实施例提供了一种新型多元适体分子在磁珠免疫化学发光AFP中的应用,包括多元适体分子,其通式为:Mag-NH-C(S)-NH-R1-L1-[C(O)-NH-Ap1]n,n为正整数且不小于4,其中Mag-NH2为氨基磁珠,Ap1至少包括核酸单链序列或者核酸双链序列,L1选自长链基团,R1为不存在或者选自多元结构。优选的,L1选自至少提供多元氨基的C1-C100长链基团。
优选的新型多元适体分子的通式如下所示:
在本发明的一个或多个实施方式中,多元适体分子中R1的多元结构选自碳链或者杂链或者多元环结构。
在本发明的一个或多个实施方式中,氨基磁珠的粒径为0.01-1000μm。
在本发明的一个或多个实施方式中,还包括与所述新型多元适体分子配合的抗体标记物和检测物质AFP,形成免疫复合物,其通式如下所示:
其中,抗体标记物至少包括Ab1-X和Ab2-X,其中Ab1和Ab2为AFP的单克隆抗体或者多克隆抗体,X为标记物,m为正整数,且不小于1。X能与底物反应产生光信号,X产生的光信号强度与检测物质AFP浓度成正比。因此,新型多元适体分子免疫复合物产生的光信号强度,可以通过检测物质AFP的校准曲线求出检测物质AFP的浓度。
在本发明的一个或多个实施方式中,新型多元适体分子免疫复合物,抗体标记物中标记物X选自碱性磷酸酶。
在本发明的一个或多个实施方式中,新型多元适体分子免疫复合物,适体分子Ap1是针对检测物质AFP的特异性适体分子。
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