[发明专利]用于杜鹃属物种鉴定的引物、试剂盒和方法在审
| 申请号： | 202210107971.0 | 申请日： | 2022-01-28 |
| 公开（公告）号： | CN114410825A | 公开（公告）日： | 2022-04-29 |
| 发明（设计）人： | 夏静;郑夏生;李楚源;张慧晔;李淑如 | 申请（专利权）人： | 广州白云山和记黄埔中药有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州广典知识产权代理事务所(普通合伙) 44365 | 代理人： | 万志香;曾银凤 |
| 地址： | 510515 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 杜鹃 物种 鉴定 引物 试剂盒 方法 | ||
1.一种用于杜鹃属物种鉴定的PCR扩增引物，其特征在于，其选自以下至少一对：
SEQ ID NO.19与SEQ ID NO.20所示序列，或其互补序列；
SEQ ID NO.21与SEQ ID NO.22所示序列，或其互补序列。
2.根据权利要求1所述的用于杜鹃属物种鉴定的PCR扩增引物，其特征在于，所述PCR扩增引物为SEQ ID NO.21与SEQ ID NO.22所示序列。
3.根据权利要求1或2所述的用于杜鹃属物种鉴定的PCR扩增引物，其特征在于，所述杜鹃属物种为映山红亚属，进一步包括岭南杜鹃Rhododendron mariae Hance、广东杜鹃Rhododendron kwangtungense Merr.et Chun、南昆杜鹃Rhododendron naamkwanenseMerr.、溪畔杜鹃Rhododendron rivulare Hand.-Mazz.、映山红Rhododendron simsiiPlanch.、两广杜鹃Rhododendron tsoi Merr.、乳源杜鹃Rhododendron rhuyuenense Chunex Tam。
4.一种用于杜鹃属物种鉴定的试剂盒，其特征在于，其包括权利要求1或2所述的PCR扩增引物。
5.权利要求1-2任一所述的PCR扩增引物的目的核酸扩增片段在杜鹃属物种鉴定中的应用。
6.一种杜鹃属物种鉴定的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)对待鉴定杜鹃属物种的样本提取DNA；
2)对提成得到的DNA，用权利要求1或2所述的PCR扩增引物进行扩增，获得扩增产物；
3)对扩增产物进行分析。
7.根据权利要求6所述的杜鹃属物种鉴定的方法，其特征在于，扩增的温度和程序为：95℃，3min；95℃，15s，56℃，15s，72℃，15s，35个循环；72℃，5min。
8.根据权利要求6所述的杜鹃属物种鉴定的方法，其特征在于，所述对扩增产物进行分析，包括：测序，序列拼接得到扩增子进行比对。
9.根据权利要求8所述的杜鹃属物种鉴定的方法，其特征在于，所述对扩增产物进行分析，还包括：对扩增产物进行比对后建立进化树。
10.根据权利要求8或9所述的杜鹃属物种鉴定的方法，其特征在于，所述对扩增产物进行分析，还包括：对扩增产物进行比对后，导入基因多态性分析软件中进行核苷酸多样性分析。
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