[发明专利]抑制或沉默DUSP4基因表达的物质和检测DUSP4蛋白含量或基因表达的物质的应用

说明书

本发明公开了抑制或沉默DUSP4基因表达的物质和检测DUSP4蛋白含量或基因表达的物质的应用。抑制或沉默DUSP4基因表达的物质的应用为在制备预防和/或治疗结核病的产品中的应用。

技术领域

本发明属于生物技术领域。具体地说，本发明涉及抑制或沉默DUSP4基因表达的物质和检测DUSP4蛋白含量或基因表达的物质的应用。

背景技术

我国的结核病疫情和结核菌感染情况都相当严重，是全球30个结核病高负担国家之一，结核病人数位居世界第二，仅次于印度。根据2021年全球结核病报告表明，2020年我国新发结核病例84.2万，结核病死亡人数约3万，在传染病中居第一位。我国约20％左右人口感染了结核菌，其中5％可能早期发病，5-10％在其一生中的任何时候可能发病。结核潜伏感染具有发展为活动性结核病的风险，研究显示85％-90％新诊断的活动性肺结核是由结核潜伏感染(1atent tuberculosis infection，LTBI)发展而来，由此可见，结核潜伏感染者成为结核病患者的重要来源。因此，结核病的早期诊断和鉴别诊断对结核病疫情的控制具有极其重要的意义。

目前约30-50％的结核病患者不排菌或排菌量很少，通过细菌学或分子生物学的方法无法确诊，如痰涂片显微镜检查和分枝杆菌培养的阳性率约30％左右，结核菌核酸检测的阳性率约50-70％，需通过免疫学方法检测宿主的免疫应答来辅助诊断菌阴结核病。目前在临床常用的免疫学辅助诊断方法主要有结核菌素皮肤试验(TST)、γ干扰素释放试验(IGRAs)和结核抗体检测，TST和IGRAs可诊断结核菌感染，不能鉴别是结核菌潜伏感染还是活动性结核病，而且TST不受卡介苗接种的影响；而结核抗体检测的灵敏度和特异性较差，世界卫生组织不推荐用于结核病的诊断。因此，研发新的有效的菌阴结核病诊断和鉴别诊断方法及早期疗效判断指标是非常有益的。

双特异性磷酸酶4(DUSP4)基因编码的蛋白(MKP-2)是双特异性蛋白磷酸酶亚家族的一员，这些磷酸酶通过磷酸丝氨酸/苏氨酸和磷酸酪氨酸残基的去磷酸化使其靶激酶失活，它们对与细胞增殖和分化相关的丝裂原活化蛋白(MAP)激酶超家族(MAPK/ERK、SAPK/JNK、p38)成员进行负性调节。DUSP4通过磷酸丝氨酸/苏氨酸和磷酸酪氨酸残基的去磷酸化使MAP激酶失活，抑制抗菌效应分子的表达，从而调节免疫反应，是炎症反应的重要负性调节因子。但DUSP4优先使ERK和JNK去磷酸化，不影响p38 MAP激酶；其中ERK途径与Th2分化有关；Th1细胞产生的细胞因子依赖于JNK活性；p38激活有利于Th1。DUSP4已证明在细胞凋亡、氧化应激反应和衰老中发挥作用，在先天性和适应性免疫细胞反应中发挥重要作用。DUSP4是一把双刃剑，可以防止T细胞过度激活，也抑制TCR反应，这限制了T细胞对抗原的反应，可能会损害T细胞依赖性B细胞反应，而使CD4⁺T细胞功能低下，适应性免疫反应缺陷。细胞免疫应答在抗结核免疫中发挥重要的作用，而其中CD4⁺T细胞是抗结核的主力军。Subuddhi A等(Subuddhi A，Kumar M，Majumder D，et al.Unraveling the role of H3K4trimethylation and lncRNA HOTAIR in SATB1 and DUSP4-dependent survival ofvirulent Mycobacterium tuberculosis in macrophages.Tuberculosis(Edinb).2020Jan；120：101897.)的研究发现，DUSP4在感染结核分枝杆菌强毒株H₃₇Rv的巨噬细胞中的表达水平明显高于感染弱毒株H₃₇Ra的巨噬细胞；DUSP4基因敲除会降低THP-1巨噬细胞中H₃₇Rv的存活率，但不会降低H₃₇Ra的存活率。

发明内容

本发明的目的之一是在于提供抑制或沉默DUSP4基因表达的物质以及检测DUSP4蛋白含量或基因表达的物质的应用。

本发明提供了抑制或沉默DUSP4基因表达的物质在制备预防和/或治疗结核病的产品中的应用。