[发明专利]一种船舶压载水微藻含量的检测方法

权利要求书

1.一种船舶压载水微藻含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：取压载水水样，经过滤、离心后得到微藻沉淀，将微藻沉淀溶于溶剂中，经超声、静置处理后，获得叶绿素溶液A，测定溶液A的吸光度值，计算溶液A中叶绿素a的含量；

步骤2：将上转换纳米荧光探针加入与步骤1中叶绿素溶液A相同的溶剂中进行分散，形成探针溶液B；

步骤3：将步骤1的叶绿素溶液A经溶剂稀释配制成具有不同浓度的叶绿素溶液，分别将不同浓度的叶绿素溶液与探针溶液B混合，并测定混合溶液的发光光谱，通过叶绿素溶液中叶绿素a在红光区的吸收和探针溶液B在红光区的发射，产生竞争发射，从而建立叶绿素a含量与红色发光强度之间关系曲线；

步骤4：根据叶绿素a含量与微藻细胞生物量的对应关系曲线，获得压载水中的微藻细胞生物量与红色发光强度关系模型；

所述上转换纳米荧光探针为NaYF₄:Yb,Er或Y₂O₂S:Tm,Er；所述上转换纳米荧光探针在波长为980或1550 nm近红外光作为激发源，发射光波长区域位于640-670 nm的红色发光。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤1中，测量叶绿素溶液在649nm与665 nm波长处的吸光度值，通过以下公式计算叶绿素a含量：

式中，A₆₆₅为溶液在665 nm吸收光值，A₆₄₉为溶液在649 nm吸光度值，a和b为系数，C_a即为叶绿素a含量。

3.据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述溶剂包括二甲基亚砜、丙酮、二甲基甲酰胺或氯仿。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤2中，探针溶液B中，上转换纳米荧光探针的浓度为0.05-0.5 mol/L。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤2中的上转换纳米荧光探针粒径为50-150 nm。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤4中，取相同压载水水样，分别采用显微镜计数法计数压载水的微藻数量，同时采用步骤1所述方法计算叶绿素a含量，建立叶绿素含量与微藻细胞生物量的对应关系曲线。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述微藻包括小球藻、叉鞭藻、扁藻、盐藻或新月菱形藻。