[发明专利]3-羟基丁酸、4-羟基丁酸和3-羟基戊酸三元共聚物P(3HB-4HB-3HV)及其微生物生产有效

专利信息
申请号: 202210115391.6 申请日: 2022-02-07
公开(公告)号: CN114134096B 公开(公告)日: 2022-05-13
发明(设计)人: 陈国强;黄悟哲;何宏韬;吴赴清;兰宇轩 申请(专利权)人: 清华大学;北京微构工场生物技术有限公司
主分类号: C12N1/21 分类号: C12N1/21;C12P7/625;C12R1/01;C12R1/40;C12R1/19;C12R1/05
代理公司: 北京知联天下知识产权代理事务所(普通合伙) 11594 代理人: 张迎新;史光伟
地址: 100084*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 羟基 丁酸 戊酸 三元 共聚物 hb hv 及其 微生物 生产
【权利要求书】:

1.一种重组菌,其特征在于,所述的重组菌中scpA、scpB、sucD、ogdA、4hbD、orfZ、dhaT和aldD过表达,且,所述的重组菌中sdhE、gabD、sad和prpC弱化表达,其中,所述的重组菌为嗜盐单胞菌属(Halomonas)、假单胞菌属(Pseudomonas)、大肠杆菌属(Escherishia)、罗氏真养杆菌(Ralstonia eutropha)、气生单胞菌属(Aeromonas)、芽孢杆菌属(Bacilllus)或巨大产碱杆菌(Alcaligenes latus)。

2.根据权利要求1所述的重组菌,其特征在于,所述的重组菌中phaA、phaB和phaC过表达。

3.根据权利要求1或2所述的重组菌,其特征在于,所述的重组菌中phaG和phaJ弱化表达。

4.一种重组菌的制备方法,其特征在于,所述的制备方法包括过表达scpA、scpB、sucD、ogdA、4hbD、orfZ、dhaT和aldD,且,弱化表达sdhE、gabD、sad和prpC,其中,所述的重组菌为嗜盐单胞菌属(Halomonas)、假单胞菌属(Pseudomonas)、大肠杆菌属(Escherishia)、罗氏真养杆菌(Ralstonia eutropha)、气生单胞菌属(Aeromonas)、芽孢杆菌属(Bacilllus)或巨大产碱杆菌(Alcaligenes latus)。

5.一种生产P(3HB-4HB-3HV)的方法,其特征在于,所述的方法包括发酵培养权利要求1-3任一所述的重组菌。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述的发酵的培养基中包含相关碳源和/或非相关碳源;

所述的相关碳源选自γ-丁内酯、4-羟基丁酸、1,2-丁二醇、1,3-丁二醇、1,4-丁二醇、1,6-己二醇、1,8-辛二醇、1,10-葵二醇、1,12-十二烷二醇、丙酸、戊酸或庚酸中的一种或两种以上的组合;

所述的非相关碳源选自葡萄糖、葡萄糖酸钠、甘油、乙酸、己酸、木糖、纤维素、乳糖或果糖中的一种或两种以上的组合。

7.根据权利要求5或6所述的方法,其特征在于,所述发酵培养的第16-28小时进行补料。

8.一种调节P(3HB-4HB-3HV)中单体比例的方法,其特征在于,所述的方法包括发酵培养权利要求1-3任一所述的重组菌。

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