[发明专利]一种高产乙醇肺炎克雷伯菌噬菌体及其应用

说明书

本发明公开了一种高产乙醇肺炎克雷伯菌噬菌体及其应用。具体而言，本发明提供了一种噬菌体，其保藏编号为CGMCC No.23085。本发明还提供了所述的噬菌体在制备特异高效地裂解高产乙醇肺炎克雷伯菌的试剂中的应用。本发明噬菌体可在短时间内大量增殖，并对温度和酸碱度具有良好的耐受性，可用于治疗由HiAlc Kpn引起的非酒精性脂肪肝。

技术领域

本发明是关于一种噬菌体及其应用，具体地说，是关于一种高产乙醇肺炎克雷伯菌噬菌体，以及该噬菌体在制备用于治疗由高产乙醇肺炎克雷伯菌(high alcohol-producing Klebsiella pneumoniae,HiAlc Kpn)引起的非酒精性脂肪肝的药物中的应用，属于生物技术领域。

背景技术

肠道微生态菌群是一个复杂的环境，肠道菌群与机体的生理和代谢有着千丝万缕的联系。研究表明，当肠道菌群中存在高产乙醇的肺炎克雷伯菌时，其可在肠道中定植、持续产生乙醇，且产生的乙醇可在肝脏乙醇脱氢酶、过氧化氢酶和微粒体乙醇氧化系统等的作用下通过门静脉进入肝脏，从而引发非酒精性脂肪肝。非酒精性脂肪肝目前已成为引起全球慢性肝病的首要原因，若未对脂肪肝及时进行治疗，脂肪肝可逐渐发展为脂肪性肝炎、肝纤维化、肝硬化和肝细胞癌。

肺炎克雷伯菌属于肠杆菌科克雷伯氏菌属，是一种重要的条件致病菌和医源性感染菌，常寄居于人体呼吸道和肠道中。因为近年来抗生素的不合理使用，肺炎克雷伯菌的耐药情况日益严峻，抗生素治疗的效果越来越不尽如人意。目前，肺炎克雷伯菌已被列入全球医院抗生素耐药危机的微生物名单，且其多重耐药率呈逐年上升趋势。

噬菌体治疗是一种20世纪新兴的利用噬菌体特异性抑制感染病原菌的方案。在耐药情况日益严峻的形势下，噬菌体治疗再次受到全球研究者的关注。噬菌体广泛分布于自然界中，是一种可以特异性侵染细菌的病毒，导致宿主菌代谢紊乱或者裂解死亡。噬菌体不仅可以在不破坏动植物细胞的情况下特异性杀伤细菌，还具有增殖快、易基因改造等特点。目前已有通过噬菌体治疗多重耐药细菌感染的多个成功案例。

尽管已有多种噬菌体制剂被用于预防控制细菌的感染，但目前尚未有针对HiAlcKpn的噬菌体的报道，治疗由HiAlc Kpn所致非酒精性脂肪肝的噬菌体治疗方法尚处空白。

因此，如果能提供一种可以特异性裂解HiAlc Kpn的噬菌体，将对于由HiAlc Kpn所致非酒精性脂肪肝的治疗具有重要意义。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种新的肺炎克雷伯菌噬菌体。

本发明的另一目的在于提供所述噬菌体的相关应用。

本案发明人在研究中发现一株裂解性高产乙醇肺炎克雷伯菌噬菌体，本发明中命名为phiTH1。本发明的噬菌体phiTH1已于2021年8月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，其保藏日期：2021年8月20日；分类命名为：克雷伯菌噬菌体，保藏编号为CGMCCNo.23085。本发明中亦称该菌为噬菌体phiTH1。

本发明的噬菌体phiTH1属有尾噬菌体，对温度和酸碱度的耐受性良好，可在温度4-40℃和pH 5-10的条件下保持稳定效价。噬菌体与细菌的最佳感染复数(multiplicityof infection,MOI)为0.001。并且，本发明的噬菌体phiTH1的潜伏期在0-20分钟，爆发期在20-80分钟，随后进入稳定期。本发明的噬菌体可以裂解HiAlc Kpn菌株，特别是对于HiAlcKpn菌株W14(保藏编号为CGMCC No.12540，Genebank号为GCA_001676825.1，为现有技术中的一株HiAlc Kpn菌株)。本发明的噬菌体phiTH1在感染复数为10到0.0001的范围内均可有效抑制高产乙醇肺炎克雷伯菌的生长，可为开发治疗由HiAlc Kpn所致非酒精性脂肪肝的抗生素替代疗法奠定基础。

具体而言，一方面，本发明提供了一种噬菌体，其保藏编号为CGMCC No.23085。