[发明专利]从母乳中分离阿克曼氏菌的方法以及产品

说明书

本发明涉及一种从母乳中分离阿克曼氏菌的方法，所述方法包括如下步骤：对母乳样本进行16S菌群分析，筛选出含有阿克曼氏菌的母乳样本；用稀释剂对所述含有阿克曼氏菌的母乳样本进行稀释，制备样本稀释液；将所述样本稀释液接种至富集培养基进行富集培养，制备富集培养液；将所述富集培养液接种于分离培养基进行分离培养，收集培养物。采用本发明方法，能够从母乳样本中分离得到阿克曼氏菌。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，涉及一种从母乳中分离阿克曼氏菌的方法以及产品。

背景技术

Akkermansia muciniphila(Akk)是定植在胃肠道黏液层的可特异性降解黏蛋白的革兰氏阴性严格厌氧菌，最先是在2004年由荷兰瓦赫宁根大学微生物学实验室的研究者们从人类粪便中分离得到。并经过鉴定，得到一种新的黏液降解菌(标准株ATCC BAA-835)。Akkermansiaceae从属于Akkermansia属、疣微菌门，为疣微菌门第Ⅱ科(FamilyII.Akkermansiaceae fam.nov.)，Akkermansia属是科内唯一菌属，该属和其16SrRNA极度相关的序列广泛存在于脊椎动物(如人、兔、小鼠和蟒蛇等)的肠道内。

近年来的许多研究表明，Akk和人类的许多代谢疾病有一定的关联。研究发现，Akk具有良好的调节代谢的能力，口服Akk可改善动物脂代谢和肠道通透性，起到预防肥胖和改善脂多糖内毒素血症的作用。初步的临床实验也表明，Akk安全性良好，适量补充可显著降低超重和肥胖患者的胰岛素分泌和总胆固醇水平，减轻胰岛素抵抗。此外，在炎症性肠病、糖尿病、自闭症、癫痫、高血压等疾病中也相继报道了Akk改善疾病症状的作用。Akk与机体肠道生态、代谢、神经等生理状态密切相关，具有良好的肠道益生作用。在已鉴定的下一代有益微生物中，人类肠道菌群中的Akk是一种非常有前景的候选细菌。

Akk作为典型的肠道厌氧菌，其分离和纯化难度极大，目前成功分离到的菌株十分有限：例如Muriel Derrien等发表的“Akkermansia muciniphila gen.nov.,sp.nov.,ahuman intestinal mucin-degrading bacterium”一文提到的分离阿克曼氏菌的方法；再例如CN109355349A公开了一种阿克曼氏菌特异性筛选培养基以及筛选阿克曼氏菌的方法。传统报道的分离Akk的方法，其样品来源均为粪便，粪便中细菌基数较大，3％含量的Akk分离相对较为容易。而母乳本身细菌基数小，研究表明初乳样本中每1ml的平均基因拷贝数log值为1.25，从母乳中分离Akk菌比从粪便中分离Akk菌难度大得多，将从粪便中分离Akk菌的方法应用于母乳中Akk菌的分离根本难以成功。因此，目前尚无从母乳中分离Akk菌的报道。

发明内容

基于以上技术问题，本发明的目的之一是提供一种从母乳中分离阿克曼氏菌的产品。采用该产品，能够从母乳中成功分离出阿克曼氏菌。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种从母乳中分离阿克曼氏菌的产品，所述产品包含富集培养基、分离培养基和样本稀释剂中的至少一种；