[发明专利]一种生物合成玻色因的方法有效
申请号: | 202210135732.6 | 申请日: | 2022-02-15 |
公开(公告)号: | CN114410704B | 公开(公告)日: | 2023-06-27 |
发明(设计)人: | 刘金 | 申请(专利权)人: | 上海云洛生物技术有限公司 |
主分类号: | C12P17/06 | 分类号: | C12P17/06;C12M1/40;C12M1/02;C12M1/12;C12M1/38;C12M1/34;C12M1/00;B01D36/00 |
代理公司: | 上海未可期专利代理事务所(普通合伙) 31360 | 代理人: | 徐磊 |
地址: | 201403 上海市奉*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物 合成 方法 | ||
本发明公开了一种生物合成玻色因的方法,涉及到生物合成玻色因领域,包括以下步骤:S1,溶解分离处理;S2,压滤处理;S3,一次浓缩;S4,去除杂质;S5,二次浓缩;S6,纯品消毒,因可通过搅拌设备可对混合液进行后续的离心式压滤处理,无需转移混合液,也无需等待,当混合液搅拌后即进行离心式压滤处理,使得S1中的木糖、碳酸氢钠缓冲液、异丙醇混合液搅拌30分钟即可充分混合,代替了现有技术中,搅拌混合液需要至少两个小时才能搅拌充分的方式。
技术领域
本发明涉及生物合成玻色因领域,特别涉及一种生物合成玻色因的方法。
背景技术
玻色因由木糖转换生成,具有广泛的生物活性,可以激活黏多糖的合成,促进生成透明质酸和胶原蛋白;玻色因还可改善真皮与表皮间的粘合度,通过诱导真皮和表皮结构成分的合成,促进受损组织的再生,帮助维持真皮的弹性,预防皮肤老化,研究表明,玻色因易于生物降解,不会在生物体内积累,没有毒性。
目前,玻色因的生产方法主要是化学合成法,但由于利用生物酶催化制备更加安全高效,成本低廉且对环境更加友好,因此此方法越来越受到关注。尽管酶催化专一,产物相对较纯,副产物几乎没有,但是在反应过程中不可避免的引入了酶蛋白,且会有一些生物胶体产生。目前所使用的方法已经无法得到高纯度的玻色因。
因此,发明一种生物合成玻色因的方法来解决上述问题很有必要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种生物合成玻色因的方法,以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种生物合成玻色因的方法,包括以下步骤:
S1,溶解分离处理:将木糖溶于碱性的碳酸氢钠缓冲液中,在酶催化反应结束后,往溶液中加入11%的异丙醇,并通过搅拌设备充分搅拌,得到第一液体产物;
S2,压滤处理:将第一液体产物通过搅拌设备进行离心式压滤,得到第二液体产物;
S3,一次浓缩:将第二液体产物加热蒸发,得到第三液体产物;
S4,去除杂质:将第三液体产物快速冷却,第三液体产物表面形成胶体物质,将胶体物质底部的液体单独排出,将胶体物质单独分离后压滤,压滤后挤出的液体和胶体物质下方的液体混合形成第四液体产物;
S5,二次浓缩:将第四液体产物进行真空脱水,脱去95%的水后对其进行蒸馏,蒸馏去乙酸乙酯后获得玻色因纯品;
S6,纯品消毒,将玻色因纯品在66℃-69℃,保持25min进行消毒后得到玻色因成品。
优选的,所述S1中的木糖、碳酸氢钠缓冲液、异丙醇混合液搅拌30分钟。
进一步的,因可通过搅拌设备可对混合液进行后续的离心式压滤处理,无需转移混合液,也无需等待,当混合液搅拌后即进行离心式压滤处理,使得S1中的木糖、碳酸氢钠缓冲液、异丙醇混合液搅拌30分钟即可充分混合,代替了现有技术中,搅拌混合液需要至少两个小时才能搅拌充分的方式。
优选的,所述S1中搅拌设备在搅拌木糖、碳酸氢钠缓冲液、异丙醇混合液时搅拌速度每隔五分钟递增一个阶级,一个阶级的速度增加为:100rpm,初始时,搅拌设备的搅拌速度为:50rpm。
其中,S1中搅拌设备在搅拌木糖、碳酸氢钠缓冲液、异丙醇混合液时搅拌速度每隔五分钟递增一个阶级,保证了混合液在逐渐增速搅拌的情况下又初步混合达到初步被离心压滤的作用,使得下一步压滤处理的时间变短,压滤处理时第一液体产物即可排出,避免了下一步压滤处理不充分的现象。
优选的,所述S3中第二液体产物加热蒸发时,搅拌设备对第二液体产物进行离心式搅拌。
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