[发明专利]一种电泳缓冲液

说明书

本发明提供了一种电泳缓冲液，由以下原料调节pH至8.3‑8.6制成：三羟甲基氨基甲烷、EDTA二钠、NaCl和蒸馏水。本发明制备的电泳缓冲液进行血清醋酸纤维薄膜电泳实验，出现五条的概率大，区带清晰可见，分区明显；本发明制备的缓冲液的离子强度低，呈碱性缓冲液，缓冲液pH容易调整，离子强度容易进行计算，适合开展替代巴比妥‑巴比妥钠的所有电泳实验。此外，根据需要还可以将本发明制备的电泳缓冲液使用在其他不同pH及不同离子强度的生命科学实验研究中。

技术领域

本发明属于生物化学技术领域，具体涉及一种电泳缓冲液。

背景技术

生物化学是普通高校医学、动物医学和生产类专业的一门重要专业基础课程，是一门以实验为基础的学科。该实验教学侧重于大分子物质的定性、定量分析技术，其中一项重要而基本的实验技术就是电泳。

电泳实验中尤以醋酸纤维素薄膜电泳简便、直观、实用，具有电渗小，分离速度快，区带清晰，操作简单，样品用量小等特点，在高校开展率很高，是高校生化实验教学中最基本的教学项目之一。此方法是利用蛋白质为两性电解质。在一定的pH环境中，其表面所带电荷的用量不同，另外，颗粒的大小，形态也不相同，即在通电情况下，在电场中的泳动速度不同电场中电压越高电极对荷电质点作用力越大，质点的泳动速度必然较快但电压还受支持介质长度的影响，亦荷电质点的移动速度与支持介质上单位长度电压差成正比，即与电势梯度成正比，这样就能把不同的蛋白加以分离。近些年巴比妥和巴比妥钠两种药品不好购买，一方面因素是由于特殊药品管控严格，另一方面实验药品需要量较多、购买量受限。再者，巴比妥-巴比妥钠缓冲液在实验过程中容易在电极两端形成结晶影响电流泳动效率，导致阳性结果不易判断。

血清蛋白电泳在应用上具有广泛的应用前景，其中血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳中可将血清蛋白分离为五个较明显的区带为清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白。对于某种血清蛋白的异常变化则可以用来推测是否发生了某些疾病，例如血清球蛋白水平对神经介入术后急性缺血性脑卒中患者炎症因子和神经激素水平有一定影响，血清球蛋白的异常增多还可能与多发性骨髓瘤的疾病发生有一定的关系。多发性骨髓瘤会分泌异常单克隆免疫球蛋白(M蛋白)导致异常球蛋白增加，正常球蛋白合成减少等。因此，需要开发一种电泳缓冲液尤为重要。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供一种电泳缓冲液，本发明制备的电泳缓冲液出现五条区带结果的概率高，加入了NaCl，有效的减少了电渗现象的产生几率，同时NaCl的加入使得缓冲体系离子强度增加更加适宜进行电泳实验。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种电泳缓冲液，由以下原料调节pH至8.3-8.6制成：三羟甲基氨基甲烷(tris-碱)、EDTA二钠、NaCl和蒸馏水。

优选地，所述三羟甲基氨基甲烷(tris-碱)、EDTA二钠、NaCl和蒸馏水的用量比为10.800g：0.930g：1.317g：1L。

优选地，调节pH使用硝酸溶液。

优选地，所述硝酸溶液的质量分数为50％。

本发明还提供一种上述电泳缓冲液的制备方法，将质量为10.800g的三羟甲基氨基甲烷(tris-碱)，质量为0.930g的EDTA二钠和质量为1.317g的NaCl加入体积为1L的蒸馏水中充分溶解，得到预备液，将所述预备液用硝酸溶液将pH值调至8.3-8.6，制得THE电泳缓冲液。

本发明还提供上述制备的THE电泳缓冲液的应用，所述THE电泳缓冲液用于电泳实验中。

本发明与现有技术相比具有以下优点：