[发明专利]一种可高效诱导体液和细胞免疫的天然微生物和植物来源复合双佐剂及其制备方法和应用

说明书

本发明属于免疫学技术领域，公开一种可高效诱导体液和细胞免疫的天然微生物与植物来源复合双佐剂，包括单磷酰脂质A和麦冬皂苷，其制备步骤如下：S1，用吐温80、蓖麻油和乙醇等将单磷酰脂质A溶解；S2，用吐温85、氢化蓖麻油和甘油等将麦冬皂苷溶解；S3，将单磷酰脂质A溶液和麦冬皂苷进行混合，分装密封而成。本发明双佐剂的原料易得、制备工艺简单、成本较低、较为稳定；将两种具有单免疫应答类型的天然来源佐剂利用通路、应答类型、靶点的互补原则，发挥其协同优势，既起到疫苗接种部位缓释及促进抗原递呈作用，又能产生高效的Th2型体液与Th1型细胞免疫应答反应，既能焕发机体产生高效的天然免疫应答又能激发获得性免疫应答安全性高，适用性强。

技术领域

本发明涉及免疫学技术领域，涉及疫苗佐剂，特别涉及一种可高效诱导体液和细胞免疫的天然微生物和植物来源复合双佐剂及其应用。

背景技术

疫苗是将病原微生物(如细菌、立克次氏体、病毒等)及其代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用转基因等方法制成的用于预防传染病的自动免疫制剂。疫苗成分里面如果只有抗原组分，则免疫原性往往不够强，注射到人体可能不会引起足够的免疫反应，不足以抵抗相应的病原体入侵，因此在应用疫苗时，往往将其与疫苗佐剂一起注射。疫苗佐剂是能够非特异性地改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答、发挥辅助作用的一类物质，其能够诱发机体产生长期、高效的特异性免疫反应，提高机体保护能力，同时又能减少疫苗抗原的用量，降低疫苗的生产成本。在疫苗研制过程中，为了制备安全有效的疫苗，必须考虑佐剂的使用。佐剂与疫苗成份的配伍，使二者形成稳定、安全、具有免疫原性的疫苗复合物。因此，对疫苗使用的佐剂进行研究一直是疫苗研究过程中的重要环节。佐剂作为非特异性免疫增强剂对疫苗接种后诱导有效的免疫应答，发挥着至关重要的作用。

佐剂是指与抗原同时或预先使用的，能有效增强机体针对抗原的免疫应答能力或改变免疫反应类型，其自身却不具有免疫原性、不能单独作用引起免疫应答的物质。目前常用的佐剂有氢氧化铝、脂质体、弗氏佐剂、粘膜免疫佐剂、CpG序列、皂角甙、细胞因子、纳米粒子以及其他天然微生物和植物来源的佐剂，它们都能够有效增强抗原的免疫原性，但是当前全球上市的并得到美国FDA批准的人用疫苗佐剂只有氢氧化铝佐剂，经欧盟批准并上市的疫苗佐剂MF59、重组霍乱毒素B亚单位和AS系列(AS04、03、01)等少数几种。虽佐剂的研究比较广泛且深入，但是能够应用的却很少，其原因主要如下：首先，佐剂的安全性仍需要进一步提高；其次，佐剂的靶向性仍不强，增强疫苗免疫原性效果仍不够理想，因而制约了佐剂的应用范围；第三，多数佐剂的免疫作用机制仍不太明朗，虽然多种佐剂已被证实有很好的免疫增强效果，但目前国际上对其作用机理仍众说纷纭；第四，佐剂免疫途径的选择、剂量的设定，以及佐剂种类的选择等也是其开发中需要面对的问题。但上述疫苗佐剂大多作用于调节T细胞和抗原提呈细胞(APC)活性，它们仅可诱导单一的体液或者细胞免疫应答，且单佐剂诱导机体免疫应答水平低、偏置Th1或Th2型反应、毒性和副作用大。