[发明专利]一株费氏链霉菌新菌株及其应用

说明书

本发明公开了一株费氏链霉菌新菌株及其应用，该费氏链霉菌新菌株命名为费氏链霉菌V‑1‑3，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.23478，保藏日期为2021年9月24日。费氏链霉菌V‑1‑3在高氏一号固体培养基上菌落较小、呈黄色圆形，表面褶皱、中心有不平整凸起、四周有绒毛，菌落较致密不易挑取，产黄色色素不扩散，革兰氏染色呈阳性。ZEISS扫描电镜下观察菌丝宽度约0.8μm，符合链霉菌属形态特征。实验证明，费氏链霉菌(Streptomyces fradia.)V‑1‑3具有丰富的天然产物生产能力，其次级代谢产物及生物合成基因簇值得进一步研究分析，具有发掘新结构抗生素的潜力。

技术领域

本发明属于微生物药学领域，具体涉及一株费氏链霉菌新菌株及其应用。

背景技术

抗生素的滥用导致“超级细菌”的泛滥，医药发展步入“后抗生素”时代， 人类健康问题面临巨大挑战，新结构的抗生素亟需发掘与开发。放线菌数量多、 分布广。自抗生素起源的近百年来，放线菌尤其是链霉菌属一直作为抗生素来 源的重要菌属。然而，由于土壤生态系统微生物多样性研究的广泛性，自土壤 中寻找新结构抗生素极具挑战性。因此，研究人员聚焦在特殊生境中的微生物 资源上，如深海、盐湖、红树林、极地冰川、高寒草甸等。银川北部(“银北”) 地区气候特殊，常年干旱少雨，年蒸发量远大于降水量，导致土壤盐分高、碱 性强，有着百万亩的盐碱地。有相关研究表明微生物在盐碱环境下长期进化过 程中获得了多种代谢潜力，是新抗生素发掘的重要资源。“银北”盐碱地这一特 殊生态系统可能蕴含着独特的未被发现的微生物和天然产物。

基因组时代的到来和新一代测序技术的发展为新菌株及其代谢产物的发掘 提供了便利。放线菌属因其蕴藏丰富的隐性次级代谢产物生物合成基因簇，可 能编码新结构未知天然产物，再次成为人们关注的焦点。分子网络化聚类分析、 HPLC-Q-TOF-MS/MS技术在微生物次级代谢产物方面的应用为菌株化学多样 性的挖掘提供了技术保障，为新结构抗生素的发现奠定基础。

发明内容

针对现有技术中的上述不足，本发明提供了一株费氏链霉菌新菌株及其应 用。

为了达到上述发明目的，本发明采用的技术方案为：

提供一株费氏链霉菌新菌株，命名为费氏链霉菌V-1-3，分类命名为链霉菌Streptomyces sp.，已于2021年09月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员 会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3 号)，保藏编号为CGMCCNo.23478。

进一步地：费氏链霉菌V-1-3在高氏一号固体培养基上菌落较小、呈黄色圆 形，表面褶皱、中心有不平整凸起、四周有绒毛，菌落较致密不易挑取，产黄 色色素不扩散，革兰氏染色呈阳性。ZEISS扫描电镜下观察菌丝宽度约0.8μm， 符合链霉菌属形态特征。

进一步地：链霉菌新菌株的分离方法，包括以下步骤：

(1)取样：采集自宁夏银川北部盐碱地的土壤样品；

(2)稀释：在9mL无菌水中加入1g土壤样品和适量玻璃珠，振荡10min， 静置30s，制成土壤原液，稀释度记为10^-1，吸取1mL土壤原液的上清液加入盛 有9mL无菌水的试管中充分混匀，稀释度为10^-2，从此试管中吸取1mL加入到 另一盛有9mL无菌水的试管中混合均匀，以此类推制成稀释液，至稀释度为10^-4；

(3)涂布：用移液枪分别吸取100μL不同稀释度的稀释液均匀涂布在加入 100mg/L无菌重铬酸钾的高氏1号固体培养基上，28℃培养5-7d；

(4)筛选：观察菌落的生长状态，在超净工作台中及时挑取培养基中生长 出的新菌落，进行分离培养；经多次平板划线后获得纯种费氏链霉菌V-1-3。