[发明专利]一种热休克蛋白抑制剂及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及肿瘤治疗、生物医用材料领域，尤其涉及一种热休克蛋白抑制剂及其制备方法与应用。本发明首次提出，在腹腔热灌注时灌注热休克蛋白抑制剂，即可降低热休克蛋白对其它目标蛋白的保护作用，从而提高热疗对肿瘤的杀伤效果。本发明将HSP90的天然抑制剂表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和金属离子通过配位作用形成纳米颗粒。纳米颗粒拥有更稳定的化学性质而且更容易被细胞内化。被细胞内化后EGCG与金属离子解离，不但能有效抑制HSP90，而且能发挥金属离子的生物学功能。

技术领域

本发明涉及肿瘤治疗、生物医用材料领域，尤其涉及一种热休克蛋白抑制剂及其制备方法与应用。

背景技术

腹腔热灌注化疗(hyperthermicintraperitoneal chemotherapy，HIPEC)是一种治疗腹腔内肿瘤的手段，自1980年被Spratt等首次报道后，一直用于消化道肿瘤发生腹膜腔转移的患者(J.S.Spratt,R.A.Adcock,W.Sherrill,S.Travathen,Hyperthermicperitoneal perfusion system in canines,Cancer research 40(2)(1980)253-5.)。目前已有Ⅰ级证据证实HIPEC在治疗和预防胃癌、结直肠癌、腹膜假黏液瘤、腹膜间皮瘤等恶性肿瘤的腹膜种植方面具有良好的效果，特别对于腹膜假黏液瘤和恶性腹水的控制，HIPEC具有独特的优势。

腹膜由单层间皮细胞、基底膜和5层纤维结缔组织组成，厚度约90μm。腹膜腔是晚期妇科恶性肿瘤发生种植转移的主要位置。HIPEC预防和治疗肿瘤腹膜腔转移的可能机制包括：(1)恶性肿瘤在43℃持续1h即可出现不可逆损害，而正常组织可耐受47℃持续1h。因此，通过合适的温度，HIPEC可直接通过热效应杀死肿瘤细胞。此外，HIPEC可直接抑制DNA的复制、转录和修复，在组织水平导致肿瘤血管血栓形成。(2)HIPEC治疗过程中的液体流动产生剪切力可直接导致肿瘤细胞死亡，冲刷组织导致肿瘤细胞发生失巢凋亡。(3)高温可导致肿瘤细胞膜、肿瘤血管通透性发生变化，减少肿瘤细胞对化疗药物的排泄率，增加肿瘤细胞中化疗药物的浓度。(4)HIPEC通过腹腔给药可增加腹腔内肿瘤病灶局部药物的作用浓度。(5)HIPEC的最大组织穿透深度为5mm，而普通化疗药物的组织穿透深度＜3mm，HIPEC可增加某些药物在肿瘤深部的药物浓度，由此与化疗产生协同效应。

但是，当细胞暴露于高温的时候，就会由热激发合成热休克蛋白(Heat shockproteins，HSPs)，用来保护其它蛋白质，增强细胞对热刺激的抵御能力。从而在第二次，第三次热疗时，加热杀伤肿瘤细胞的作用被大大减弱甚至治疗无效。热休克蛋白根据同源程度及分子量大小可分为HSP110，HSP90家族，HSP70家族，HSP60，小分子HSP及泛素等家族。其中，HSP90是在受激时非常重要的保护目标蛋白的家族之一。HSP90抑制剂主要分为两大类，第一类为天然抑制剂，一般为植物中提取的抗生素类化合物。第二类为人工合成的抑制剂。其中，天然抑制剂副作用较小，具有更高的临床转化前景。但现有的Hsp90抑制剂例如格尔德霉素水溶性差，毒性大，不适于用于协同肿瘤热疗。而表没食子儿茶素没食子酸酯在体内稳定性差，半衰期较短，造成药效有限。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种热休克蛋白抑制剂及其制备方法与应用。

针对现有技术的不足，本发明将EGCG与金属离子配位，使苯酚上的羟基提前与金属离子(例如锰离子、钙离子)配位，增加了其稳定性。而在被细胞内化后，在溶酶体酸性环境中，此配位键断裂，EGCG活性被释放。而且金属离子也能发挥其独特的抗肿瘤活性。例如，Mn²⁺有激活免疫的作用，Ca²⁺有诱导内质网应激进而引起凋亡的抗肿瘤活性。在腹腔热灌注等肿瘤热疗方法中使用本发明的纳米颗粒，将大大增加热疗效果。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：提供一种纳米颗粒，所述纳米颗粒为将能抑制热休克蛋白的天然化合物和金属离子通过配位作用形成。