[发明专利]一种茵陈蒿汤复方制剂的指纹图谱检测方法

说明书

本发明公开了一种茵陈蒿汤复方制剂的指纹图谱检测，所述检测方法包括如下步骤：S1：供试品溶液制备：将茵陈、栀子和大黄在甲醇中混合，超声、过滤、浓缩、稀释、过滤得到供试品溶液；S2：对照品溶液制备：将目标对照品溶解，过滤，即得对照品溶液；S3：取供试品溶液和对照品溶液分别注入液相色谱仪，得到色谱图；将色谱图导入国家药典委员会的中药色谱指纹图谱相似度评价系统，自动计算相似度；所述色谱条件为：C18色谱柱；以水为流动相A，甲醇为流动相B；流速为0.8‑1.2mL/min；采用梯度洗脱，检测波长为205‑280nm；进样量为5‑20μL；柱温为25‑35℃。本发明所述指纹图谱检测方法有效控制茵陈蒿汤复方制剂特征成分，所述指纹图谱质量好，精密度、稳定性和重复性佳。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种茵陈蒿汤复方制剂的指纹图谱检测方法。

背景技术

汉代张仲景所著《伤寒论》中有记载治疗湿热黄疸之中药名方，首选茵陈蒿汤，能驱热邪通水源、除胃热而泄瘀热。现代药理研究表明此复方具有促胆红素代谢、抗炎利胆、抗氧化、抗病毒及改善肝功能之功效，常被用来治疗各种肝脏疾病茵陈蒿汤复方制剂成分复杂多样，包含不同结构类型的化学成分，即黄酮类(如栀子素、茵陈黄铜)，有机酸(如3-咖啡酰奎宁酸)，羟基蒽醌类(如大黄酚、大黄酸、大黄素)等，以其多靶点、多成分的整体调节为主，在体内具有协同或拮抗等相互作用。正确揭示中药复方作用机制的科学内涵须得阐明成分间的配伍关系和相互作用，了解其基础的化学成分。

近年来，因茵陈蒿汤明显的临床作用效果，研究人员多以制药方式不同及药物入血成分检测研究为主，实验条件高、耗时长等导致无法大面积推广应用。

因此，本发明针对茵陈蒿汤复方制剂的有效成分进行了研究，建立了一种更加高效、便捷的实验方法，利用该方法能够初步探索中药复合成分的化学成分，进行成分的有效鉴定。

发明内容

针对上述现有技术的缺点，本发明提供一种茵陈蒿汤复方制剂的指纹图谱检测方法。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种茵陈蒿汤复方制剂的指纹图谱检测方法，包括如下步骤：

S1：供试品溶液制备：将茵陈、栀子和大黄在甲醇中混合，超声、过滤、浓缩、稀释、过滤得到供试品溶液；

S2：对照品溶液制备：将目标对照品溶解，过滤，即得对照品溶液；

S3：取供试品溶液和对照品溶液分别注入液相色谱仪，得到色谱图；将色谱图导入国家药典委员会的中药色谱指纹图谱相似度评价系统，自动计算相似度；

所述液相色谱仪的色谱条件为：C18色谱柱；以水为流动相A，以甲醇为流动相B；流速为0.8-1.2mL/min；采用梯度洗脱，检测波长为205-280nm；进样量为5-20μL；柱温为25-35℃。

本发明采用高效液相色谱指纹图谱检测方法可以高效的同时检测出茵陈蒿汤复方制剂中绿原酸、咖啡酸、京尼平、栀子苷、芦丁、槲皮素、没食子酸、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素、大黄素甲醚共11中成分的特征峰及含量，并导入国家药典委员会的中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行数据分析，有效验证茵陈蒿汤复方制剂的化学成分，为临床上治疗肝病提供理论验证。

本申请所述国家药典委员会的中药色谱指纹图谱相似度评价系统为2012版国家药典委员会的中药色谱指纹图谱相似度评价系统。

作为本发明的优选实施方式，色谱条件中，流速为1.0mL/min；检测波长为254nm；进样量为20μL；柱温为30℃。

本发明选用波长为254nm为色谱检测波长，能够全面展现茵陈蒿汤复方制剂的各吸收峰，色谱峰锋形、分离度较好，并且能够满足定量检测的要求。

作为本发明的优选实施方式，所述色谱柱为Shim-pack GIST C18色谱柱，规格为250mm×4.6mm，5μm。