[发明专利]溶酶体靶向性罗丹明B酰肼类荧光探针及制备方法和应用

权利要求书

1.一种溶酶体靶向性罗丹明B酰肼类荧光探针，其特征在于，具有如下结构：

。

2.权利要求1所述的溶酶体靶向性罗丹明B酰肼类荧光探针的制备方法，其特征在于，包括：

步骤一，将罗丹明B与水合肼在无水甲醇中混合搅拌，将混合物加热至回流状态，在50-70℃保持2-4小时，降温至20-30℃后, 减压旋蒸除去甲醇溶剂，残留物溶于盐酸中，用NaOH溶液调节pH至9-10，得到中间物质罗丹明B酰肼；

步骤二，将步骤一获得的罗丹明B酰肼、4-吗啉基苯甲醛、和无水乙醇混合后搅拌加热，在70-90℃条件下保持体系回流状态搅拌8-12小时，然后冷却至室温，得到所述的罗丹明B酰肼类铝离子荧光探针。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤一中，罗丹明B与水合肼的摩尔比为1：16.5。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤二中，罗丹明B酰肼与4-吗啉基苯甲醛为等摩尔比。

5.权利要求1所述的溶酶体靶向性罗丹明B酰肼类荧光探针用于检测铝离子浓度的应用。

6.权利要求1所述的溶酶体靶向性罗丹明B酰肼类荧光探针用于检测细胞内溶酶体的铝离子浓度及可视化成像的应用。

7.一种检测铝离子的方法，其特征在于，包括：

步骤一，向含有权利要求1所述的溶酶体靶向性罗丹明B酰肼类荧光探针的溶液体系中分别加入铝离子配制成系列标准溶液，使用激发波长540 nm激发待测体系，在576 nm处得到最大强度的发射荧光，测定其荧光强度，绘制荧光强度F₀/F与铝离子浓度的标准曲线；

步骤二，向含有权利要求1所述的溶酶体靶向性罗丹明B酰肼类荧光探针的溶液体系中加入含铝离子的待测样品，使用激发波长540 nm激发待测体系，在576 nm处得到最大强度的发射荧光，根据测定的荧光强度和步骤一所述的标准曲线，计算待测样品中的铝离子浓度。

8.根据权利要求7所述的铝离子检测方法，其特征在于：步骤一和步骤二中，溶酶体靶向性罗丹明B酰肼类荧光探针的溶液体系中以水和乙醇的混合溶剂，水和乙醇的体积比为1:9。

9.根据权利要求7所述的铝离子检测方法，其特征在于：步骤一和步骤二中，检测体系pH=7.4，检测体系的温度为20-25摄氏度。

10.一种识别细胞内溶酶体的铝离子的方法，其特征在于：将权利要求1所述的溶酶体靶向性罗丹明B酰肼类荧光探针加入到待测的孵育的细胞中，观察到红色荧光表明即表明细胞中含有铝离子。