[发明专利]一种用于检测GBM细胞的H4核酸适配体和检测试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 202210154791.8 | 申请日： | 2022-02-21 |
| 公开（公告）号： | CN114480404A | 公开（公告）日： | 2022-05-13 |
| 发明（设计）人： | 王兆寅;尤永平;胡席席;戴志晖;张军霞 | 申请（专利权）人： | 南京师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/115 | 分类号： | C12N15/115;G01N33/569;G01N33/574 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 孙斌 |
| 地址： | 210046 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 gbm 细胞 h4 核酸 适配体 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种用于检测GBM细胞的H4核酸适配体，其特征在于，所述H4核酸适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1-10中任一所示。
2.一种用于检测GBM细胞的H4核酸适配体检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包括缓冲液和权利要求1所述用于检测GBM细胞的H4核酸适配体。
3.根据权利要求2所述的检测GBM细胞的H4核酸适配体检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒中的缓冲溶液包括Tris-HCl、NaCl和MgCl2。
4.根据权利要求3所述的用于检测GBM细胞的H4核酸适配体检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲溶液Tris-HCl浓度为4～10mM、NaCl浓度为200～300mM、MgCl2浓度为20～100mM。
5.根据权利要求2所述的用于检测GBM细胞的H4核酸适配体检测试剂盒，其特征在于，所述H4核酸适浓度为50～150μM。
6.一种权利要求1所述的检测GBM细胞的H4核酸适配体或者权利要求2所述的用于检测GBM细胞的H4核酸适配体检测试剂盒在GBM检测中的应用。
7.根据权利要求6所述的用于检测GBM细胞的H4核酸适配体检测试剂盒在GBM检测中的应用，其特征在于，所述检测过程为：将粉末状H4适配体经去离子水溶解形成H4适配体溶液，再加入缓冲溶液中进一步稀释，经过金属浴加热后退火冷却，与GBM细胞进行孵育，孵育染色后进行共聚焦拍摄。
8.根据权利要求7所述的用于检测GBM细胞的H4核酸适配体检测试剂盒在GBM检测中的应用，其特征在于，所述H4适配体溶液在缓冲液中稀释至5～15μM。
9.根据权利要求7所述的用于检测GBM细胞的H4核酸适配体检测试剂盒在GBM检测中的应用，其特征在于，所述金属浴温度为85～100℃，加热时间为2～10min。
10.根据权利要求7所述的用于检测GBM细胞的H4核酸适配体检测试剂盒在GBM检测中的应用，其特征在于，所述H4适配体与胶质细胞孵育的时间为10～30min，孵育的温度为37℃。
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