[发明专利]一种鲣鱼菊粉压片糖果中L-鹅肌肽的测定方法

说明书

本发明提供了一种L‑鹅肌肽的测定方法，该检测方法主要包括质谱条件的优化、色谱柱的选择、流动相的优化、标准液和供试液的制备，其中测定方法为液相色谱和质谱连用的方法，以甲酸和乙腈作为流动相。该测定方法通过对供试品制备方法的优化和测试条件的改进，使得该测定方法相比于现有的测定方法，精密度、耐用性和准确度更高，可快速、精确地得到鲣鱼菊粉压片糖果中L‑鹅肌肽的含量，进一步保证了糖果的品质。

技术领域

本发明属于检测方法技术领域，涉及一种用于鲣鱼菊粉压片糖果中L-鹅肌肽的测定方 法。

背景技术

鹅肌肽是动物体内的组氨酸二肽，广泛存在于动物的骨骼肌及大脑中，肌肽类生物活性 肽具有显著的抗氧化、抗衰老、维持机体pH稳定和神经调节等功能。近几年，随着鹅肌肽 在特医食品和保健食品领域的需求量越来越大，开发快速、可靠的鹅肌肽的检测方法越来越 迫切。

目前针对鹅肌肽的检测尚无相关国家标准，测定方法主要有高效液相色谱法、离子交换 色谱法和毛细管电泳法。但是这三种方法对样品的分离纯化要求都较高，测定鹅肝肽含量时 步骤繁琐、效率较低。

为了提高测量精度和效率，目前一般采用液相色谱和质谱联用的方法对动物体内的活性 肽进行测定。文献：UHPLC-ESI-MS/MS法测定动物源食物提取物中肌肽与鹅肌肽的含量[J]. 分析测试学报,2018.中公开了一种超高效液相色谱－串联三重四极杆的质谱分析方法，提供 了一种可精确、快速测定肌肽含量的方法；中国专利201910599463.7公开了一种测定鱼头 中肌肽和鹅肝肽含量的高效液相色谱法，采用负载铜离子的介孔改性Al-SBA-15作为高效液 相色谱分析时色谱柱中的填料，对肌肽和鹅肌肽的吸附和分离效果好，检测的精确度和灵敏 度高，且操作简便。

但对测定条件和测定设备本身进行改进检测成本较高，且供试样品对于测量的精确度和 效率的影响至关重要，因此有必要探索一种新的鹅肌肽测定方法，该方法中应提供一种可用 于提高测量精确度和效率的供试品制备方法。

发明内容

本发明针对现有技术存在的问题，提供了一种鲣鱼菊粉压片糖果中L-鹅肌肽的测定方 法，该测定方法通过对供试品制备方法的优化和测试条件的改进，使得该测定方法相比于现 有的测定方法，精密度、耐用性和准确度更高，可快速、精确地得到鲣鱼菊粉压片糖果中 L-鹅肌肽的含量，进一步保证了糖果的品质。

本发明提供了一种L-鹅肌肽的测定方法，所述测定方法包括以下步骤：标准溶液的配 置、供试液的制备、标准工作曲线的绘制、检测；

进一步地，所述供试液的制备包括以下步骤：

(1)取试样研磨混合均匀后，加入盐酸和苯酚，振摇均匀；

(2)将溶液加热消解后冷却，冷却后蒸干溶剂；

(3)继续冷却后，加入水超声溶解残渣，所得溶液加水稀释摇匀。

进一步地，所述供试液的制备步骤(1)中，盐酸与苯酚的用量比为3-6mL:0.01-0.2g。

优选地，所述供试液的制备步骤(1)中，盐酸与苯酚的用量比为4-6mL:0.05-0.15g。

进一步地，所述供试液的制备步骤(2)中，加热消解温度为100-120℃，时间为4-8h。

进一步地，所述检测具体为液相色谱和质谱连用测定。

进一步地，所述液相色谱中使用的流动相包括甲酸、乙酸、甲酸铵、乙腈中的一种或几 种。

优选地，所述液相色谱中使用的流动相为甲酸和乙腈。

进一步地，所述甲酸的质量浓度范围为0.1-0.3％。

进一步地，所述液相色谱的色谱柱为C18柱、C8柱、氨基柱中的任意一种。