[发明专利]NtNAC083基因在负调控烟草冷胁迫应答中的应用在审
| 申请号： | 202210156602.0 | 申请日： | 2022-02-21 |
| 公开（公告）号： | CN114686514A | 公开（公告）日： | 2022-07-01 |
| 发明（设计）人： | 郭永峰;李伟;文利超;张增林;刘涛;邓智超;张豆豆 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院烟草研究所（中国烟草总公司青州烟草研究所） |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/66;C12N15/29;A01H5/00;A01H6/82 |
| 代理公司： | 青岛清泰联信知识产权代理有限公司 37256 | 代理人： | 张洁 |
| 地址： | 266100 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | ntnac083 基因 调控 烟草 胁迫 应答 中的 应用 | ||
1.NtNAC083基因在负调控烟草冷胁迫应答中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，NtNAC083基因通过调节冷胁迫关键基因CBF1或NCED3的表达来负调控烟草对冷胁迫的响应。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，NtNAC083基因通过影响丙二醇和离子渗透率来负调控烟草对冷胁迫的耐受性。
4.根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于，所述NtNAC083基因的序列如SEQID NO：1所示。
5.根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于，所述冷胁迫的条件为4℃下处理30天。
6.提高烟草冷胁迫应答能力的方法，其特征在于，包括以下步骤：
构建烟草基因NtNAC083的过表达载体，经农杆菌介导转化到烟草中，获得提高烟草冷胁迫应答能力的转基因植株。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，构建烟草基因NtNAC083的过表达载体的方法为：
根据NtNAC083全长序列设计以下引物：
NtNAC083-F：CACTGTTGATACATATGGTTGGGAAAATTAGCTCGG；NtNAC083-R：TGTTGATTCAGAATTCTCACTGAAATTGAAAAGCTGGA；
以普通烟草K326 cDNA为模板，利用PrimeSTAR HSDNA高保真酶进行NtNAC083全长序列扩增，使用NEB限制性内切酶NdeI和EcoRI-HF将过表达载体pRI101-AN进行线性化，利用infusion方法将目的基因片段构建到pRI101-AN中，提取重组质粒进行酶切验证并测序，得到过表达载体。
8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，构建烟草基因NtNAC083的过表达载体后，利用农杆菌介导的叶盘法转化普通烟草K326，通过对所得转基因植株的NtNAC083基因表达量分析，得到提高烟草冷胁迫应答能力的转基因植株NtNAC083-OE。
9.根据权利要求6-8任一项所述的方法，其特征在于，冷胁迫的条件为4℃下处理30天。
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