[发明专利]一种用于乳腺癌治疗的siSphk1-DOX共递送靶向纳米制剂及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种用于乳腺癌治疗的siSphk1‑DOX共递送靶向纳米制剂及其制备方法和应用，所述共递送靶向纳米制剂由酸敏感脂质外层和DOX‑DE‑siSphk1纳米核组成，其中酸敏感脂质外层为DOPE、PC‑98T和胆固醇的混合物，DOX‑DE‑siSphk1纳米核中先将DOX荷载于DE胶束疏水内核形成DOX‑DE胶束，再将siRNA借助电荷物理结合于DOX‑DE胶束表面形成DOX‑DE‑siSphk1纳米粒。本发明还具体公开了该siSphk1‑DOX共递送靶向纳米制剂的制备方法及其在乳腺癌治疗中的应用。本发明的靶向纳米递送系统可通过静脉注射给药，借助酸敏感脂质外层和胶束内核实现siSphk1和DOX在乳腺癌细胞的靶向递送作用。

技术领域

本发明属于靶向纳米药物递送系统技术领域，具体涉及一种用于乳腺癌治疗的siSphk1-DOX共递送靶向纳米制剂及其制备方法和应用。

背景技术

乳腺癌是一种高度异质性的疾病，其病变过程涉及多种分子作用机制。目前，阿霉素（DOX）仍是临床上广泛使用的蒽醌类抗乳腺癌药物，可用晚期乳腺癌的治疗。但是DOX的治疗窗窄、心脏毒性大、耐药性强，这些问题严重制约其临床应用。很多情况下，化疗对乳腺癌患者的初期治疗有效，但在长期治疗过程中，会导致治疗失败甚至恶化复发。近年来，核酸（siRNA）和化疗药物的同时递送在乳腺癌治疗中引起极大的兴趣，有望提高阿霉素的治疗效果，并降低其心脏毒性和多药耐药性，实现乳腺癌的有效治疗。

研究显示，鞘氨醇激酶1（Sphingosine kinases 1，Sphk1）在乳腺癌中异常高表达，并参与肿瘤的生长和转移。RNA干扰技术将双链小RNA（siRNA）导入细胞，使靶基因发生转录后沉默，进而降低相关蛋白的生成，有望成为肿瘤治疗的新策略。然而，由于siRNA自身的分子量和分子结构的局限，在临床应用中面临众多挑战。本发明采用实验室合成的二油酰磷脂乙醇胺（Dioleoyl ethanolamine，DE）制备胶束疏水内核，胶束疏水内核包裹DOX，并借助物理吸附siRNA，外层包裹酸敏感脂质层，构建DOX和siSphk1共荷载纳米制剂，将DOX和siSphk1靶向递送至肿瘤组织，避免对正常组织的伤害。同时发挥DOX和siSphk1的抗肿瘤治疗作用，将有望提高DOX的抗癌治疗效果，并降低其心脏毒性和多药耐药现象，目前尚没有该方面的相关文献报道。

发明内容

为了降低DOX的心脏毒性和多药耐药性，本发明提供了一种用于乳腺癌治疗的siSphk1-DOX共递送靶向纳米制剂及其制备方法和应用，该方法制备的siSphk1-DOX共递送靶向纳米制剂应用于乳腺癌治疗，可实现siSphk1和DOX的乳腺癌靶向递送和治疗。

本发明为解决上述技术问题采用如下技术方案，一种用于乳腺癌治疗的siSphk1-DOX共递送靶向纳米制剂，其特征在于：所述共递送靶向纳米制剂由酸敏感脂质外层和DOX-DE-siSphk1纳米核组成，其重量百分比为酸敏感脂质外层60%-80%，DOX-DE-siSphk1纳米核20%-40%，其中酸敏感脂质外层为DOPE、PC-98T和胆固醇的混合物，其重量百分比为DOPE30%-45%、PC-98T 20%-45%和胆固醇10%-50%，DOX-DE-siSphk1纳米核中先将DOX荷载于DE胶束疏水内核形成DOX-DE胶束，其重量百分比为DOX 25%-45%和DE 55%-75%，再将siRNA借助电荷物理结合于DOX-DE胶束表面形成DOX-DE-siSphk1纳米粒，其重量百分比为siSphk11%-4%和DOX-DE 96%-99%，Sphk1 F：5’-CTGTCACCCATGAACCTGCT-3’，Sphk1 R：5’-TACAGGGAGGTAGGCCAGTC-3’，该共递送靶向纳米制剂静脉给药后靶向递送至乳腺癌细胞，用于乳腺癌靶向治疗。