[发明专利]一种虎奶菇菌核的平板培养方法

说明书

本发明涉及一种虎奶菇菌核的平板培养方法，属于食用菌培养技术领域。本发明所述平板培养方法：(1)PDA培养基的配置：用酸或碱将PDA培养基的pH值调节为4‑9，配置PDA培养基，灭菌冷却至60‑75℃，加入双氧水溶液，得到含有双氧水的PDA培养基；(2)将虎奶菇菌种接种在装有步骤(1)所述的含有双氧水的PDA培养基的平板上，置于恒温培养箱A中培养，至菌丝长满PDA平板，转接至恒温培养箱B中恒温培养。本发明所述方法不需要木屑、棉籽壳等复杂的袋料固体培养基，具有接种方便、培养周期短、易于控制等优点。

技术领域

本发明属于食用菌培养技术领域，尤其是指一种虎奶菇菌核的平板培养方法。

背景技术

虎奶菇(Pleurotus tuber-regium)，担子菌，侧耳属，是一种能产生大型菌核和子实体的食药用真菌，广泛分布于世界热带和亚热带地区，包括非洲、亚洲和大洋洲。虎奶菇在民间用于治疗头痛、胃痛、哮喘、天花、高血压等多种疾病。虎奶菇子实体和菌核含有挥发油、氨基酸以及多糖类物质，其主要活性成分为虎奶菇多糖。目前，有研究报道从PTR菌核和菌丝体细胞壁中提取的非淀粉多糖和多糖蛋白复合物具有免疫调节和直接杀伤肿瘤的活性。虎奶菇不同发育阶段的细胞壁含量有很大差异，虎奶菇菌核细胞壁含量高达78.4±0.7％DW，远高于其他阶段。菌核细胞壁含有大量糖蛋白，在菌丝和子实体细胞壁中均未发现糖蛋白。且研究发现菌核通常具有良好的药理活性(如抗癌、免疫调节、抗炎等)，这可能与其特有的超支化β-1,4,6-葡聚糖含量高有关。

菌核是某些真菌在生长过程中的一种特殊生长阶段，虎奶菇菌核的生成还是通过袋料培养，其具体的形成机制还不明确。由于培养周期长(菌丝长满袋料后3个月)，因此虎奶菇菌核的生产受到了较大限制，也严重影响了其中超支化β-葡聚糖和糖蛋白等活性成分的研究与开发。因此，寻找一种快速便捷的虎奶菇菌核的培养方法迫在眉睫。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了一种虎奶菇菌核的平板培养方法。本发明所述方法不需要木屑、棉籽壳等复杂的袋料固体培养基，具有接种方便、培养周期短、易于控制等优点。

本发明的目的是提供一种虎奶菇菌核的平板培养方法，包括以下步骤：

(1)PDA培养基的配置：用酸或碱将PDA培养基的pH值调节为5-9，配置PDA培养基，灭菌冷却至60-75℃，加入双氧水溶液，得到含有双氧水的PDA培养基；

(2)将虎奶菇菌种接种在装有步骤(1)所述的含有双氧水的PDA培养基的平板上，置于恒温培养箱A中培养，至菌丝长满PDA平板，转接至恒温培养箱B中恒温培养_。

在本发明的一个实施例中，步骤(1)中，所述酸选自盐酸、草酸、柠檬酸或乙酸。

在本发明的一个实施例中，步骤(1)中，所述碱选自氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠或碳酸钠。

在本发明的一个实施例中，步骤(1)中，所述含有双氧水的PDA培养基中双氧水浓度为10^-5-10^-2mol/L。

在本发明的一个实施例中，步骤(2)中，所述虎奶菇菌种接种中，在所述PDA平板中接种(1-1.5)cmⅹ(1-1.5)cm的长满菌丝的PDA琼脂块，并使带菌丝面接触所述PDA培养基。

在本发明的一个实施例中，步骤(2)中，恒温培养箱A中温度为25-32℃。

在本发明的一个实施例中，步骤(2)中，恒温培养箱A中培养5-14天。

在本发明的一个实施例中，步骤(2)中，菌丝转接之后的恒温培养箱B中温度为22-30℃。

在本发明的一个实施例中，步骤(2)中，菌丝转接之后的恒温培养箱B中培养时间为20-60天。

本发明的上述技术方案相比现有技术具有以下优点：