[发明专利]抗大口黑鲈虹彩病毒LMBV的单克隆抗体及其应用

说明书

本发明公开了抗大口黑鲈虹彩病毒LMBV的单克隆抗体及其应用。杂交瘤细胞株LMBV‑MCP‑8B10 2G6，其于2021年12月28日保藏于中国典型培养物保藏中心（CCTCC），地址：湖北省武汉市武昌区八一路299号，邮编：430072，保藏编号为：CCTCC NO：C202208。抗大口黑鲈虹彩病毒LMBV的单克隆抗体是由杂交瘤细胞株LMBV‑MCP‑8B10 2G6产生。本发明中LMBV MCP的单抗的成功制备为LMBV免疫学检测方法的建立、抗病毒免疫制剂、病毒感染致病机理的研究奠定了基础，也可用于对LMBV MCP在体内外的定量和定位分析。

技术领域

本发明属于免疫学和病毒学交叉技术领域，具体涉及一种具有能特异识别病毒主要衣壳蛋白的抗大口黑鲈虹彩病毒LMBV的单克隆抗体及其应用。

背景技术

大口黑鲈又名加州鲈，是一种淡水鱼类，属鲈形目，鲈亚目，太阳鱼科，黑鲈属，是我国近年来养殖规模发展最为迅速的品种之一。据《中国渔业统计年鉴》统计的数据，2020年全国鲈鱼总产量达到61.95万吨，已成为我国第十大淡水鱼类养殖品种。但随着养殖规模的扩大、养殖密度的增加、养殖模式的单一化及养殖环境的恶化，鲈鱼的病害问题日益凸显。其疾病主要包括病毒性疾病、细菌性疾病、寄生虫性疾病和真菌性疾病。 其中病毒性病原中，虹彩病毒和弹状病毒是最重要的两种病原。大口黑鲈虹彩病毒（Largemouth bassvirus，LMBV）是一种胞质型双链DNA病毒，属于虹彩病毒科蛙病毒属。LMBV感染加州鲈引起的典型症状为：昏睡、体内外出血和脏器肿大等。LMBV主要感染仔鱼和幼鱼，导致死亡率超过80%，是加州鲈养成过程中最重要的病毒性病原，造成重大的经济损失。

目前对于大口黑鲈虹彩病毒尚缺乏有效的治疗方法和防控措施，早期检测和诊断是预防该病疾病爆发的关键环节。利用特异性强的单克隆抗体开发针对大口黑鲈虹彩病毒的检测技术，不仅具有快速、灵敏的优点，也适合现场大规模检测应用。另外，制备的单克隆抗体还可应用于病毒感染致病的研究中，包括病毒基因在宿主体内或体外培养细胞中的表达、定位、抗病毒功能制品筛选及病毒感染致病机理等。主要衣壳蛋白（major capsidprotein，MCP）不仅是虹彩病毒的核心基因，也是病毒的主要结构蛋白。通常利用病毒的MCP序列同源性可以对病毒进行分类和检测。尽管国内已经制备了多种鱼类病毒或病毒蛋白的单克隆抗体，但是尚未有大口黑鲈虹彩病毒MCP单克隆抗体制备及应用的相关文献与专利。因此，抗大口黑鲈虹彩病毒MCP单克隆抗体亟待研制。

发明内容

本发明的第一个目的是提供能产生抗大口黑鲈虹彩病毒LMBV的单克隆抗体的杂交瘤细胞株LMBV-MCP-8B10 2G6 ，其于2021年12月28日保藏于中国典型培养物保藏中心（CCTCC），地址：湖北省武汉市武昌区八一路299号，邮编：430072，保藏编号为：CCTCC NO：C202208。

本发明的第二个目的是提供一种抗大口黑鲈虹彩病毒LMBV的单克隆抗体，其是由杂交瘤细胞株LMBV-MCP-8B10 2G6 产生。

本发明的第三个目的是提供上述抗大口黑鲈虹彩病毒LMBV的单克隆抗体在制备检测大口黑鲈虹彩病毒LMBV MCP蛋白抗原试剂中的应用。

优选，是抗大口黑鲈虹彩病毒LMBV的单克隆抗体在制备检测大口黑鲈虹彩病毒LMBV试剂中的应用。

优选，是抗大口黑鲈虹彩病毒LMBV的单克隆抗体在用于体外感染细胞中MCP的定位的试剂中的应用。

优选，所述的试剂可以是胶体金免疫试剂盒、化学发光试剂盒、放射免疫试剂盒、酶联免疫试剂盒或荧光免疫试剂盒。

本发明的第四个目的是提供一种检测虹彩病毒LMBV MCP蛋白抗原试剂，其含有抗大口黑鲈虹彩病毒LMBV的单克隆抗体。