[发明专利]骨髓来源的成熟B细胞及其在制备治疗心肌梗死的药物中的应用

权利要求书

1.一种骨髓来源的成熟B细胞，其特征在于，为B220⁺CD19⁺CD43^-CD93^-IgM⁺IgD⁺的成熟B细胞，来源于哺乳动物的骨髓组织；

所述骨髓组织来源于小鼠，通过包括以下步骤的制备方法得到：

(1)从小鼠骨髓中获得单细胞，方法为：

①野生型小鼠在9-10周龄麻醉处死，分离股骨和胫骨，将肌肉剔除干净后准备抽取骨髓细胞；

②用剪刀剪开腿骨末端，用装有冰磷酸盐缓冲液的注射器将骨髓冲出，通过100μm过滤器过滤，在4℃下400g离心3分钟；

③弃去上清液，使用红细胞裂解液去除红细胞，离心后弃上清备用；

(2)磁珠分选与流式分选相结合以获得B220⁺CD19⁺CD43^-CD93^-IgM⁺IgD⁺的成熟B细胞，方法为：

①用IgM磁珠分离步骤(1)中骨髓单细胞中的IgM阳性细胞；

②用含有IgD的抗体稀释液重悬细胞，室温下避光孵育30分钟；

③经流式细胞分选仪收集IgD⁺的骨髓B细胞，即为B220⁺CD19⁺CD43^-CD93^-IgM⁺IgD⁺的成熟B细胞。

2.权利要求1所述骨髓来源的成熟B细胞在制备治疗心肌梗死的药物中的应用，所述心肌梗死为急性心肌梗死，包括因冠状动脉急性、持续性缺血缺氧引起的心肌坏死，所述药物采用静脉注射的方式，所述骨髓来源的成熟B细胞的有效数量不低于1×10⁵个。