[发明专利]一种检测花粉对蜜蜂的营养价值的方法

说明书

本发明涉及蜜蜂养殖技术领域，具体涉及一种检测花粉对蜜蜂的营养价值的方法。本发明提供的检测花粉对蜜蜂营养价值的方法包括：采用包含基础日粮、待测花粉和5‑乙炔基‑2'‑脱氧尿苷(EdU)的日粮饲喂蜜蜂幼虫，检测蜜蜂幼虫EdU阳性中肠上皮细胞的细胞核大小，根据细胞核大小判断待测花粉对蜜蜂的营养价值高低。本发明的检测方法以蜜蜂幼虫中肠上皮细胞的细胞核面积作为花粉对蜜蜂营养价值的评价指标，具有检测周期短、操作简单、灵敏度和准确性较高的优势，为花粉对蜜蜂营养价值的评价提供了有效的方法，适于推广应用。

技术领域

本发明涉及蜜蜂养殖技术领域，具体涉及一种检测花粉对蜜蜂的营养价值的方法。

背景技术

蜜蜂是一种完全变态昆虫，其生长发育需要经历卵—幼虫—蛹—成虫四个阶段。蜜蜂主要的食物是花蜜与花粉，因此花粉对蜜蜂尤其重要。蜂群中工蜂和幼虫生长发育所需的蛋白质主要由花粉提供，花粉对维持蜂群正常的生长、发育和繁殖具有不可替代的作用。蜂群内花粉的短缺会造成蜂群营养供给不足，出现幼虫发育不良或被拖拽出巢、成年蜂生长受阻、泌蜡和泌浆能力下降、蜂王产卵能力下降以及蜂群易感染病害等现象，严重时还会导致蜂王停止产卵，幼虫发育停滞，进一步导致蜂群群势下降等。蜜蜂主要在幼虫和繁殖时期消耗花粉。不同种类花粉对蜜蜂的营养价值不同，如向日葵花粉、玉米花粉和松属花粉会阻碍幼虫的发育，缩短寿命；使用油菜花粉进行饲喂能够延长意大利蜜蜂工蜂的寿命；食用栗属花粉和悬钩子属花粉的幼虫比食用向日葵属和岩蔷薇属花粉的幼虫体重更重。茶花粉和油菜花粉饲喂的6日龄工蜂幼虫虫体蛋白质含量显著高于荷花粉和玉米花粉(高丽娇,刘佳霖,罗文华,等.不同蜂花粉对意大利蜜蜂蜂群繁殖和工蜂发育的影响[J].动物营养学报,2019,31(10):4630-4636.)。芸苔属花粉饲喂的幼虫体型比毛连菜属、常春藤属、苋属、茄属、向日葵属和禾本科花粉饲喂的幼虫体型更大。蒲公英花粉由于缺乏氨基酸而不适合用来饲养幼虫。因此，花粉营养价值的高低直接影响蜜蜂的生长发育，决定了蜂群的盛衰。

目前，国际通用的评价花粉营养价值的方法主要采用蛋白质含量、化学评分(CS)、必需氨基酸指数(EAAI)、氨基酸比值系数分(SRCAA)、生物价(BV)和营养指数(NI)等指标进行综合评价。然而，评价不同花粉对蜜蜂的营养价值不仅仅是评价花粉本身的营养价值，更需要考虑到蜜蜂对花粉营养成分的消化吸收能力，但国际通用的营养价值评价方法没有考虑蜜蜂对花粉的消化吸收效率，无法准确地反映不同花粉对蜜蜂的营养价值。

花粉饲养试验是一种评价不同花粉对蜜蜂营养价值的经典方法，在蜂群饲养试验中以蜂群群势和封盖子量、蜂群采集活性来评价不同蜂花粉对蜂群的影响。实验室花粉饲养试验包括对幼虫的饲养和成蜂的饲养，进行花粉营养价值评价所用指标通常是与蜜蜂生长发育相关的指标，在蜜蜂的成蜂方面包括评估工蜂寿命、工蜂初生重、蜂体总蛋白含量、肠道蛋白水解活性、卵巢的发育、营养素含量指标(如蛋白质或氨基酸)、寿命、花粉消耗和消化、血淋巴指数和组织化学方面；在蜜蜂幼虫方面包括幼虫的存活率、预蛹体重、发育程度以及对目标花粉的消化率，但这些实验实验周期较长，饲养蜜蜂幼虫至预蛹期就需要8天左右，而且在饲养试验过程中容易受到包括饲养环境的温度、湿度、污染程度和试验人员的操作技术等多种因素的影响，从而对实验结果的精确度产生不利影响。因此，建立一种快速并准确地评价花粉对蜜蜂的营养价值的方法是非常必要的。