[发明专利]一种用于检测麻疹病毒的核酸适配体、试剂盒及应用有效

专利信息
申请号: 202210179393.1 申请日: 2022-02-25
公开(公告)号: CN114410640B 公开(公告)日: 2023-07-11
发明(设计)人: 周代志;罗建刚;庄杨;谢明铎;刘光存 申请(专利权)人: 世通兰达(深圳)生物科技发展有限公司
主分类号: C12N15/115 分类号: C12N15/115;C12N15/11;G01N33/58;G01N33/569
代理公司: 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 代理人: 李小焦;彭家恩
地址: 518000 广东省深圳市坪山区坑梓街道秀*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 用于 检测 麻疹病毒 核酸 适配体 试剂盒 应用
【说明书】:

本申请公开了一种用于检测麻疹病毒的核酸适配体、试剂盒及应用。本申请用于检测麻疹病毒的核酸适配体为Seq ID No.1所示序列或其互补序列的核酸片段。本申请用于检测麻疹病毒的核酸适配体,具有较高的特异性和亲和力,具有分子小、可进行修饰、合成容易、不易降解、无毒、无免疫原性等优点;克服了麻疹病毒特异性抗体不易表达合成、易降解、存在非特异性免疫原性等问题。采用本申请的核酸适配体进行麻疹病毒检测不仅灵敏度高、特异性好,而且测量范围宽、操作简单,可以快速准确的检测麻疹病毒。

技术领域

本申请涉及麻疹病毒检测技术领域,特别是涉及一种用于检测麻疹病毒的核酸适配体、试剂盒及应用。

背景技术

麻疹病毒(measles virus)是麻疹的病原体,分类上属于副黏病毒科的一种单负链RNA病毒。麻疹病毒只有一个血清型,但近年来的研究表明麻疹病毒的抗原也有小的变异。麻疹是儿童常见的一种急性传染病,其传染性很强。临床特征为发热、流鼻涕、咳嗽、眼结膜炎、出疹等。人是麻疹病毒唯一的自然宿主,急性患者是传染源,患者在出疹前六天至出疹后3天有传染性。可通过飞沫和密切接触等方式传播。目前麻疹病毒感染的实验室诊断方式:病毒分离、抗体检测、抗原检测。

对于麻疹病毒的样品检测在临床检测以及实验研究中十分重要。现有技术中对于病毒感染或者病毒蛋白的检测多采用特异性的抗体进行识别,制备比较复杂,步骤比较繁琐,成本较高,在大规模推广中有一定的缺陷。并且,特异性的抗体作为一种蛋白成分,存在不易表达合成、易降解、存在非特异性免疫原性等缺点。

因此,如何研发一种新的特异性强、灵敏度高的麻疹病毒检测技术,是目前亟待解决的问题。

发明内容

本申请的目的是提供一种新的用于检测麻疹病毒的核酸适配体、试剂盒及应用。

本申请采用了以下技术方案:

本申请的一方面公开了一种用于检测麻疹病毒的核酸适配体,该核酸适配体为Seq ID No.1所示序列或其互补序列的核酸片段。

Seq ID No.1:

5’-TTCAGCACTCCACGCATAGCCATCTTACCATCCTTTACGATAAAGTCTGGGGCGTCGGCTACCTATGCGTGCTACCGTGAA-3’。

需要说明的是,本申请的核酸适配体是通过人工筛选技术-指数富集配体系统进化技术(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment,SELEX)筛选到的针对麻疹病毒靶蛋白抗原表位的核酸适配体,具有较高的特异性和亲和力。与现有的麻疹病毒特异性抗体相比,本申请的核酸适配体,克服了抗体不易表达合成、易降解、存在非特异性免疫原性等问题;并且,本申请的核酸适配体具有分子小、可进行修饰、合成容易、不易降解、无毒、无免疫原性等优点。采用本申请的核酸适配体进行麻疹病毒检测,灵敏度高、特异性好、测量范围宽、操作简单,可以快速准确的检测麻疹病毒靶蛋白,适合大规模推广,有良好的市场前景。本申请的一种实现方式中,对麻疹病毒感染病人样本和健康人样本的检测结果显示,本申请核酸适配体对麻疹病毒感染病人的阳性检出率,即灵敏度为98%,而健康人群检测的阳性检出率为0%;说明本申请的核酸适配体能够有效的检出麻疹病毒感染病人,没有假阳性。

还需要说明的是,本申请的关键在于研究发现Seq ID No.1所示序列的核酸片段能够作为特异性检测麻疹病毒的核酸适配体;可以理解,Seq ID No.1所示序列的互补序列的核酸片段同样具有相同的特异性和亲和力。

本申请的一种实现方式中,本申请核酸适配体的核酸序列上结合有荧光物质、纳米发光材料、生物素、地高辛和酶标记中至少一种。

优选的,荧光物质为荧光基团,荧光基团包括FAM荧光基团或Cy5荧光基团。可以理解,FAM荧光基团或Cy5荧光基团只是本申请的一种实现方式中采用的荧光基团,不排除还可以是其他荧光基团。

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