[发明专利]一株不具转导耐药基因能力的沙门菌噬菌体CKT1及其应用

说明书

本发明公开了一株不具转导耐药基因能力的沙门菌噬菌体CKT1及其应用，该烈性噬菌体CKT1已于2022年1月21日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为：CCTCCM2022110。本发明分离到的沙门菌噬菌体CKT1对不同来源的鸡白痢沙门菌、鸡伤寒沙门菌及肠炎沙门菌等D群沙门菌均具有裂解活性，潜伏期短，子代噬菌体爆发量高，抗噬菌体突变率低，基因组上不携带毒力基因与耐药基因，不具转导能力，不会造成耐药基因的传播，是一种安全、高效、特异性强的烈性噬菌体，不会破坏雏鸡肠道菌群。该噬菌体制剂可成为一种新型环保的净化种鸡场鸡白痢沙门菌的辅助手段，也是预防和治疗鸡群鸡白痢或鸡伤寒沙门菌感染的替代策略。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一株不具转导耐药基因能力的沙门菌噬菌体CKT1及其应用。

背景技术

沙门菌属于肠杆菌科，是食源性疾病中重要的病原菌，据统计，我国大约70～80％的食源性疾病由沙门菌感染引起。在我国，主要流行的D群沙门菌包括可引起人畜共感染的肠炎沙门菌和雏鸡高死亡率的鸡白痢沙门菌，它们是养殖业特别是禽类养殖中造成损失的重要因素。已知禽类是沙门菌最主要的宿主，其中鸡白痢沙门菌不但在群体间水平传播，还能垂直传播给下一代，给雏鸡造成极高的死亡率，严重降低生长性能；成年鸡感染后虽无明显症状，但却可以在动物和环境中广泛传播，给养殖业带来巨大经济损失。目前多数发达国家已完成鸡白痢沙门菌的净化工作，而发展中国家因养殖期间隐形感染鸡的存在，而无法完全消除沙门菌。此外，蛋、蛋制品及家禽副产品可通过食物链间接对人类健康造成危害。为了保障家禽养殖健康和蛋品、肉品安全，沙门菌病被国家中长期动物疫病防治规划(2012-2020)列为优先防控疫病。当前，种鸡场鸡白痢沙门菌的净化主要通过血清学检测不断剔除阳性感染的鸡只，以及加强饲养管理，但存在效果差、成本高昂等缺点。此外，细菌耐药性正在不断增强，而现阶段减抗的推进，都使得研发新型抗菌药物成为当前亟待解决的重要问题。

噬菌体(bacteriophage)是感染细菌、真菌、藻类、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称，因能引起宿主菌的裂解，故称为噬菌体。噬菌体是由核酸和蛋白质构成，蛋白质起着保护核酸的作用，并决定噬菌体的形态和表面特征。已知噬菌体必须利用宿主进行增殖并最终裂解宿主释放子代噬菌体。目前，噬菌体制剂作为一种新型抗菌药物正在不断被接纳，其在美国等多个国家已成为合法药物，其杀菌作用显著。但有些噬菌体基因组中含有耐药基因和编码毒力因子的基因；还有些噬菌体可将宿主菌的毒力基因与耐药基因通过噬菌体转导转移给其他细菌中，从而造成传播耐药基因与毒力基因的风险。当前国内噬菌体产品中的噬菌体菌株特性不一、效果不同，对噬菌体能否转导耐药基因与毒力基因进行评估的研究也很少。此外，致病菌的噬菌体制备必须通过宿主菌来增殖，因此宿主菌的毒力与安全性需要深入评估。因此，对筛选的噬菌体及噬菌体制剂进行安全性评估是噬菌体能否推广应用的关键。

发明内容

针对上述现有技术的不足，发明人经长期的技术与实践探索，从养殖场周边污水样品中分离得到一株不具转导耐药基因能力的烈性沙门菌噬菌体CKT1。该烈性噬菌体CKT1对不同来源的鸡白痢沙门菌、鸡伤寒沙门菌及肠炎沙门菌等D群沙门菌均具有裂解活性，潜伏期短，子代噬菌体爆发量高，抗噬菌体突变率低，不携带毒力基因与耐药基因，不会转导耐药基因至其他细菌中，可保护雏鸡肠道菌群健康，是一种安全、高效、特异性强的烈性噬菌体，具有广泛的应用前景。

具体的，本发明涉及以下技术方案：

本发明的第一方面，提供了一株不具转导耐药基因能力的鸡白痢沙门氏菌噬菌体CKT1(Salmonella phage CKT1)，该噬菌体已于2022年1月21日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为：CCTCC NO：M2022110。

所述烈性噬菌体CKT1分离养殖场周边污水样品，具有如下特征：