[发明专利]一种含自交联透明质酸钠产物及其制备方法

说明书

本发明公开了一种含自交联透明质酸钠产物及其制备方法，具体通过初步精制、均化、自交联和二次精制步骤，制备得到一种含自交联透明质酸钠膜（液）。该方法通过选择合适的透明质酸钠源头以及有效的均化方式，提高了产品的均一性，从而降低推力，提高使用舒适度；同时通过开发合适的过程精制和纯化方式，减少污染物生成，提高了产品质量，大大降低了成本。

技术领域

本发明属于透明质酸交联技术领域，具体涉及一种含自交联透明质酸钠产物及其制备方法。

背景技术

透明质酸钠是一种天然高分子材料，在人体不同部位均有分布，广泛存在于胎盘、羊水、晶状体、关节软骨、皮肤真皮层等组织。透明质酸钠由氨基葡萄糖和葡萄糖醛酸双糖结构形成长链，分子量由1000-5000000Dalton不等。由于透明质酸钠酶的作用，人体内的透明质酸钠基本处于一个动态平衡的过程，额外植入的透明质酸钠一般在一周内就会降解，因此一般通过交联方式以延长其持续时间。一般通过诸如BDDE(丁二醇缩水甘油醚)、DVS(二乙烯基砜)进行交联，也有使用两种交联剂的双交联方式提升其维持时间，以抵御透明质酸钠酶的攻击，持续时间可以达到1年以上。然后需要通过洗脱交联剂，从而降低风险，以BDDE为例，其含量必须低于2ppm，不然致癌风险将上升。同时，交联透明质酸钠在体内缓慢降解过程中也会逐步释放交联剂，因此通过自交联方式可以避免这样的风险。

专利WO2010/043106A1公开了先通过侧链进行巯基化改性，然后在氧气条件下，缓慢实现自交联的方法。该方法虽然提高了安全性，但由于过程的可控性相对较差，因此产品均一性不是特别理想，导致无法使用32G以上细针头，同时由于这个过程中包裹了诸如内毒素等杂质，后期很难洗脱，导致产品安全性也非最佳。

专利CN108264581A和CN111647193A公开了在偏碱性条件下通过偶联剂实现偶联方式的自交联，其大大降低了交联剂的毒性，提高了产品的生物相容性。但该方法在制备过程中如果没有控制好杂质如偶联剂、杂蛋白、内毒素等，尤其是内毒素仍然会超标导致无法应用到安全性要求更高的产品生产中。

除此之外，由于医用级透明质酸钠原料成本非常高，并且对环境要求苛刻，目前为了提高产品的均一性、稳定性以及安全性，如何优化产品流程、降低制备成本也显得尤为重要。

发明内容

为了克服上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种含自交联透明质酸钠产物及其制备方法。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

本发明的第一个方面提供了一种含自交联透明质酸钠产物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)初步精制：将透明质酸钠干粉完全溶解，加入CPC溶液后析出沉淀，将沉淀加入解离液中，过滤除杂，再加入超纯水析出透明质酸钠；

(2)自交联：将步骤(1)得到的透明质酸钠加入溶剂中，调pH，再加入交联剂，搅拌后得自交联透明质酸钠；

(3)均化：将步骤(2)得到的自交联透明质酸钠均化，再进行均质后得料液；

(4)二次精制：将步骤(3)得到的料液经超滤膜循环，收集浓缩液，检测合格后得终产品；

进一步的，所述步骤(1)中透明质酸钠干粉来自枯草芽孢杆菌发酵，分子量为50～150万，优选为90万；

进一步的，所述CPC溶液的浓度为0.2～2％；

进一步的，所述解离液为氯化钠溶液，所述氯化钠溶液与透明质酸钠干粉的体积质量比(mL/g)为60～100:1，优选为80:1；

进一步的，所述步骤(2)中溶剂为二甲基亚砜；所述pH调节采用精氨酸，所述pH调至9～10，优选为10；