[发明专利]一种猪瘟基因工程亚单位疫苗成品效力检验方法

说明书

本发明公开了一种猪瘟基因工程亚单位疫苗效力检验方法，涉及疫苗检测技术领域，包括以下步骤：以参考品疫苗为基准，利用ELISA方法检测待测品抗原组分的相对含量，计算相对效力RP值，RP值≥1.0为合格品。采用本发明ELISA方法进行相对效力的检测，与免疫攻毒法检测结果一致，而检测时间只需要1～2天，相比于免疫攻毒法极大地缩短了检测周期，还不使用靶动物，节约了检测成本，而且不需要P3实验室条件，不具有生物安全风险。因此，对于市场潜力巨大的猪瘟亚单位疫苗的成品检验而言，具有非常好的应用价值。

技术领域

本发明涉及疫苗检测技术领域，更具体的说是涉及一种猪瘟基因工程亚单位疫苗成品效力检验方法。

背景技术

猪瘟(slassical swine fever，CFS)以出血和发热为主要特征，呈急性或慢性经过，是一种对猪危害性极大的传染病，被国际兽疫局列为A类动物传染病。目前使用的弱毒疫苗主要是中国猪瘟兔化弱毒疫苗、日本GPE疫苗和法国的Thireval疫苗。分子生物学技术的兴起和发展，为新型猪瘟疫苗的研究和开发奠定了基础。亚单位疫苗和活载体疫苗是目前研究的热点。

猪瘟病毒基因工程亚单位疫苗属于灭活疫苗，无法像猪瘟活疫苗一样，可以通过检测成品中猪瘟活病毒的病毒含量进行成品效力评价，往往需要利用靶动物免疫接种－攻毒或通过测定中和抗体的方法进行成品效力评价。免疫攻毒试验整个周期约50天，而且因用到了猪瘟强毒，还需要用P3动物舍进行；中和抗体测定法尽管不需要攻毒，但需要给猪免疫后采血测定，试验也需30天左右。以上两种采用靶动物的方法不仅具有检测周期长，检测成本高的不足，且免疫攻毒还会带来生物安全风险。

因此，建立一种简单可行的不使用猪甚至替代动物、或其它方法用于猪瘟灭活疫苗的成品效力检验方法，以解决目前方法中存在的检测周期长、使用猪造成检测成本高以及免疫攻毒带来的生物安全风险等问题，在目前猪瘟亚单位疫苗生产中是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种猪瘟基因工程亚单位疫苗成品效力检验方法，该方法以参考疫苗为参照，采用ELISA方法检测待测品疫苗的相对效力，从而确定待测品疫苗的效力是否合格，本发明方法无需用猪或其他动物进行效力的检验，从而缩短检测周期，减少检测成本，并降低检验带来的生物安全风险。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种猪瘟基因工程亚单位疫苗成品效力检验方法，包括以下步骤：

以参考品疫苗为基准，利用ELISA方法检测待测品中抗原组分的相对含量，计算相对效力RP值，RP值≥1.0为合格品。

作为本发明优选的技术方案，所述参考品疫苗的制备方法包括：根据免疫原性研究的结果确定参考品中的抗原添加量，据此添加量制备成待检参考品疫苗，并经免疫攻毒保护试验检验合格，确定为参考品疫苗。

更优选的，所述抗原添加量为在免疫原性研究中经免疫攻毒保护试验确定的抗原最低添加量。

作为本发明优选的技术方案，所述以参考品疫苗为基准，利用ELISA方法检测待测品中抗原组分的相对含量。

经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明公开提供了一种利用ELISA方法检测猪瘟基因工程亚单位疫苗效力的方法。采用本发明ELISA方法进行相对效力的检测，与免疫攻毒法检测结果一致，而检测时间只需要1～2天，相比于免疫攻毒法极大地缩短了检测周期，节约了检测成本，还不使用靶动物进行攻毒试验，不需要P3实验室条件，不具有生物安全风险。因此，对于市场潜在大量猪瘟亚单位疫苗的检测而言，具有非常好的应用价值。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。