[发明专利]一种基于微孔板的均一的单类器官模型及其制备方法在审
申请号: | 202210187170.X | 申请日: | 2022-02-28 |
公开(公告)号: | CN114457007A | 公开(公告)日: | 2022-05-10 |
发明(设计)人: | 陈璞;金梦龙;江善青 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 江慧 |
地址: | 430072 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 微孔 均一 器官 模型 及其 制备 方法 | ||
1.一种基于微孔板的均一的单类器官模型的制备方法,其特征在于,所述方法包括:
将可传代培养的类器官消化成单细胞;
将所述单细胞与含有体积比5%~10%基质胶的类器官培养基共混,获得共混物;
将所述共混物置于底部为低粘附或超低粘附的微孔板中,然后离心以使细胞和Matrigel胶聚集于所述微孔板底部,再加入类器官培养基进行常规培养或分化培养,获得一种基于微孔板的均一性的单类器官模型。
2.根据权利要求1所述基于微孔板的均一的单类器官模型的制备方法,其特征在于,所述离心中,离心力为100g~400g,离心时间为3min~5min。
3.根据权利要求1所述基于微孔板的均一的单类器官模型的制备方法,其特征在于,所述微孔板为96孔板、384孔板和1536孔板中的一种。
4.根据权利要求1所述基于微孔板的均一的单类器官模型的制备方法,其特征在于,所述微孔板的底部为U形底或V形底。
5.根据权利要求1所述基于微孔板的均一的单类器官模型的制备方法,其特征在于,所述得到单个类器官的常规培养的时间为1~6d。
6.根据权利要求1所述基于微孔板的均一的单类器官模型的制备方法,其特征在于,所述可传代培养的类器官包括成体干细胞、正常组织、肿瘤组织来源的类器官。例如肝脏类器官、小肠类器官、胰腺相关类器官、胃类器官、肺类器官、乳腺类器官、肺癌类器官、结直肠癌类器官、胃癌类器官、肝癌类器官、乳腺癌类器官、胰腺癌类器官、食管癌类器官、前列腺癌类器官、宫颈癌类器官等中的一种。
7.一种采用权利要求1-6任一项所述方法制备得到的基于微孔板的均一的单类器官模型。
8.根据权利要求7所述的基于微孔板的均一的单类器官模型,其特征在于,所述微孔板中每个微孔仅含有一个类器官且在微孔的中心区域。
9.根据权利要求7所述的基于微孔板的均一的单类器官模型,其特征在于,所述基于微孔板的均一的单类器官模型中单个类器官的大小为50μm~500μm。
10.根据权利要求7所述的基于微孔板的均一的单类器官模型,其特征在于,所述基于微孔板的均一的单类器官模型中各孔间类器官面积变异系数小于35%。
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