[发明专利]脱蜡液及其应用

说明书

本发明涉及一种脱蜡液及其应用，所述脱蜡液包括脱蜡液I和脱蜡液II，其中脱蜡液I由质量份比为2～4:7的油酸甲酯：矿物油组成，脱蜡液II由质量份比为2～4:1的乙醇：环己酮组成。本发明的脱蜡液，由环保安全成分组成，既能与乙醇相溶，又能溶解石蜡，脱蜡效果与二甲苯相当。更进一步地，上述脱蜡液应用于病理检测组织脱蜡时，可以避免技术人员身体受到伤害、减轻环境污染和节约二甲苯净化成本。本发明制备的病理切片染色后在显微镜下能够观察到染色鲜明、结构清晰的细胞结构，与二甲苯脱蜡处理得到的结果基本一致，对医生阅片及诊断结果无影响。

技术领域

本发明涉及病理学技术领域，具体涉及一种脱蜡液及其应用。

背景技术

苏木素(hematoxylin)和伊红(eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色法，其为石蜡切片技术里常用的染色法之一。细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大，因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本的染色方法，应用及其广泛。

苏木素-伊红染色法中的操作步骤，常见主要包括：脱蜡---水化---苏木素染色---分化---蓝化---伊红染色---脱水---透明---封片；待染色石蜡切片必须把切片上支撑组织的石蜡去除，这个过程称为脱蜡，脱蜡必须干净，否则会导致切片着色不均，点状或片状不着色，核浆对比不清。目前最常用的石蜡切片的脱蜡液主要是二甲苯，二甲苯也是病理制片过程中传统的组织透明剂，透明效果好，但易使组织收缩变脆、变硬，进而使切片困难。另外，二甲苯是一种高毒挥发性溶液，具有强烈刺激性气味的神经毒素，对长期接触的人员生理系统具有特殊伤害，产生靶器官效应，可出现眼及上呼吸道明显的刺激症状、眼结膜及咽充血、头晕、恶心、四肢无力、意识模糊等症状，对病理工作人员的身体健康产生严重危害；二甲苯挥发到空气中还易造成环境污染，且苯系物分解难度大，治理成本也更高。为此，寻找二甲苯的替代品已经成为当前亟待解决的问题。

发明内容

基于此，有必要针对上述问题，提供一种脱蜡液，采用该脱蜡液进行组织脱蜡，可以完全避免使用二甲苯，从而避免技术人员身体受到伤害、减轻环境污染和节省后续清理二甲苯的开支。

一种脱蜡液，包括脱蜡液I和脱蜡液II，所述脱蜡液I由质量份比为2～4:7的油酸甲酯：矿物油组成，所述脱蜡液II由质量份比为2～4:1的乙醇：环己酮组成。

上述脱蜡液，由环保安全的成分组成，既能与乙醇相溶，又能溶解石蜡，其中油酸甲酯和矿物油组成的脱蜡液I，能够较好的溶解组织切片中的石蜡，具有较佳的脱蜡效果，且同时兼顾了残留成分能够较好的与脱蜡液II中的环已酮和乙醇相溶，从而能够在不影响组织形态的前提下，被脱蜡液II进行置换，而脱蜡液II由乙醇和环已酮组成，其中的环己酮，一方面可避免乙醇对组织产生过度脱水的作用，另一方也能够与脱蜡液I的成分更为融合，而乙醇的存在增加了脱蜡液II的极性，提高了脱蜡液II整体成分与后续染色过程中的各成分的相融性，避免溶剂物化性质变化过快导致对组织的不利影响。最终，通过脱蜡液I和脱蜡液II的配合，达到既环保，脱蜡效果与二甲苯相当、甚至更好的目的。

在其中一个实施例中，所述脱蜡液I由质量份比为3:7的油酸甲酯：矿物油组成，所述脱蜡液II由质量份比为3:1的乙醇：环己酮组成。

本发明还提供一种脱蜡液在病理学组织脱蜡染色中的应用。

在其中一个实施例中，所述染色为苏木素-伊红染色。

本发明还提供一种苏木素-伊红染色方法，包括以下步骤：

(1)取组织切片，采用上述的脱蜡液Ⅰ和脱蜡液Ⅱ，依次分别脱蜡，冲洗；

(2)苏木素染色，冲洗；

(3)盐酸酒精分化，冲洗；