[发明专利]一种测定鱼子酱中多种磺胺类药物残留的方法

说明书

本发明提供了一种测定鱼子酱中多种磺胺类药物残留的方法，涉及鱼子酱检测技术领域。本发明通过预溶解、固相萃取等处理技术对鱼子酱进行富集净化，同时加入内标溶液得到鱼子酱待测样品；然后再将待测样品进行液质检测。本发明的净化富集技术能够有效解决鱼子酱油脂含量高、基质复杂、黏性大等不易提取的问题，从而提高检测的准确性和灵敏度。本发明的检测方法可以用于鱼子酱中痕量磺胺类药物残留的定性和定量分析，为鱼子酱质量安全控制、污染物溯源、风险分析提供检测技术支持。

技术领域

本发明涉及鱼子酱检测技术领域，尤其涉及一种固相萃取-高效液相色谱串联质谱法测定鱼子酱中多种磺胺类药物残留的方法。

背景技术

鱼子酱(Caviar)由鲟鱼卵腌制而成，富含人体必需氨基酸和不饱和脂肪酸、无机盐、维生素，以及钙、铁和硒等微量元素。鱼子酱与松露、鹅肝酱并称为“世界三大美食”，素有“黑色黄金”之称，是国际上经久不衰的名贵高档食品。近年来，在政府的引导下我国已发展成集鲟鱼产品技术研发、加工、贸易于一体的水产食品加工产业，具备鱼苗繁育、养殖基地、鱼子酱及鲟鱼产品加工和销售的一整套产业链。

然而，随着鱼子酱产业的兴起和发展，对于鱼子酱产品的质量安全标准越来越严格，磺胺类等禁用物质不得检出。这些都成为制约我国鱼子酱出口的新的技术壁垒，使我国鱼子酱出口面临严峻形势。因此，控制禁用物质残留以保障鱼子酱产品质量安全，提高市场竞争力，同时避免类似2011年7月，欧盟以我国鱼子酱中孔雀石绿残留超标为由，禁止鱼子酱进境从而影响中国产鱼子酱声誉的事件再次发生，迫切需要对鱼子酱中禁用物质残留检测技术进行研究。

近年来，国内外关于磺胺类药物及代谢物残留检测方法的研究越来越得到人们的重视，主要基质为鸡蛋、畜禽产品(猪、牛、羊、鸡)、鱼及水产品等。目前，还未有同时测定鱼子酱中磺胺嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲基异恶唑和磺胺间甲氧嘧啶等12种磺胺类药物残留的固相萃取-高效液相色谱-串联质谱分析方法的文献报道。由于鱼子酱黏性较大、油脂较多，直接加入乙酸乙酯提取，鱼子酱会发生结块现象，不易提取。提供一种可以有效的去除鱼子酱中的油脂，便于提取的方法，并且同时测定鱼子酱中磺胺嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲基异恶唑和磺胺间甲氧嘧啶等12种磺胺类药物残留的方法是目前所要解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种固相萃取-高效液相色谱串联质谱法测定鱼子酱中多种磺胺类药物残留的方法，该法具有简便、灵敏度高、基质干扰小等优点，可用于日常大批量鱼子酱样品中磺胺类药物及其代谢物残留的定性、定量分析。

本发明提供的固相萃取-高效液相色谱串联质谱法测定鱼子酱中多种磺胺类药物残留的方法，包括以下步骤：

(1)取鱼子酱样品，用组织粉碎机充分捣碎均匀，装入样品袋中密封，在-18℃冷冻保存；

(2)在鱼子酱样品中加入混合内标溶液和正己烷，超声溶解后再加入乙酸乙酯进行振荡提取，离心后收集上清液；在离心后的固体中加入乙酸乙酯进行再次提取，收集上清液；合并两次的上清液，将上清液采用氮气进行吹干，去除溶剂，然后再加水溶解制成待净化溶液；

(3)将待净化溶液利用MCX固相萃取小柱进行净化，采用体积比为1:1的甲醇-水进行淋洗，采用氨水甲醇混合溶液进行洗脱，收集洗脱液；将洗脱液采用氮气进行吹干，然后再用甲酸、甲醇水的混合溶液进行溶解，过滤得到富集纯化后的待测样品；

(4)将待测样品采用高效液相色谱串联质谱法进行定性和定量检测。

本申请所述多种磺胺类药物包括12种磺胺类药物，分别为：磺胺噻唑、磺胺嘧啶、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺二甲基异恶唑、磺胺喹噁啉和磺胺二甲氧嘧啶。

优选的，步骤(2)所述鱼子酱样品与混合内标溶液的质量体积比为1:0.01g/mL，所述混合内标溶液的浓度为100ng/mL；