[发明专利]抗蝙蝠SARS相关冠状病毒RsSHC014感染的中和单克隆抗体及应用

说明书

本发明涉及冠状病毒技术领域，尤其是一种抗蝙蝠SARS相关冠状病毒RsSHC014感染的中和单克隆抗体及应用，所述单克隆抗体为SRB4、SRB10、SRB12、SRB14、SRB16中的任一种；SRB4、SRB10、SRB12、SRB14、SRB16的重链氨基酸序列分别如SEQ ID NO：1、3、5、7、9所示，SRB4、SRB10、SRB12、SRB14、SRB16的轻链氨基酸序列分别如SEQ ID NO：2、4、6、8、10所示。本申请的单克隆抗体能够特异性结合RsSHC014‑RBD蛋白，并且能有效阻断RsSHC014病毒对细胞以及小鼠的感染，可应用于RsSHC014感染的预防和治疗。

技术领域

本发明涉及冠状病毒技术领域，具体涉及一组抗蝙蝠SARS相关冠状病毒RsSHC014感染的中和单克隆抗体及应用。

背景技术

冠状病毒在系统分类上属套式病毒目(Nidovirales)冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)。冠状病毒属的病毒是具囊膜(envelope)、基因组为线性单股正链的RNA病毒，是自然界广泛存在的一大类病毒。

冠状病毒直径约80～120nm，基因组5′端具有甲基化的帽状结构，3′端具有poly(A) 尾，基因组全长约27-32kb，是目前已知RNA病毒中基因组最大的病毒。冠状病毒仅感染脊椎动物，如人、鼠、猪、猫、犬、狼、鸡、牛、禽类。冠状病毒最先是1937年从鸡身上分离出来，病毒颗粒的直径60～200nm，平均直径为100nm，呈球形或椭圆形，具有多形性。病毒有包膜，包膜上存在棘突，整个病毒像日冕，不同的冠状病毒的棘突有明显的差异。在冠状病毒感染细胞内有时可以见到管状的包涵体。

2019新型冠状病毒(SARS-CoV-2，引发新型冠状病毒肺炎COVID-19)是目前已知的第7种可以感染人的冠状病毒，其余6种分别是HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、 HCoV-HKU1、SARS-CoV(引发重症急性呼吸综合征)和MERS-CoV(引发中东呼吸综合征)。

SARS-CoV和SARS-CoV-2的爆发给人类社会的公共卫生安全带来了极大的挑战。蝙蝠SARS相关冠状病毒RsSHC014可以使用SARS-CoV的同源受体人血管紧张素转化酶 hACE2作为受体入侵细胞，表明这株蝙蝠冠状病毒据有跨种传播到人的潜在风险。冠状病毒的中和抗体主要针对病毒的受体结合结构域(RBD)，由于RsSHC014的RBD与 SARS-CoV或SARS-CoV-2的RBD均有较大差异，中和实验表明已发现的对SARS-CoV 或SARS-CoV-2有效的多种中和抗体及抗血清都无法有效中和RsSHC014这类病毒，提示 RsSHC014与SARS-CoV及SARS-CoV-2的交叉中和能力较弱，这意味着一旦RsSHC014 意外感染人群，现有储备的治疗手段很可能无法有效控制病毒感染。基于此，本发明研究团队使用RsSHC014的RBD蛋白进行了中和单克隆抗体的开发及测试工作。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗蝙蝠SARS相关冠状病毒RsSHC014感染的中和单克隆抗体及应用。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

抗蝙蝠SARS相关冠状病毒RsSHC014感染的中和单克隆抗体，为SRB4、SRB10、SRB12、SRB14、SRB16中的任一种；所述抗体能特异性结合蝙蝠SARS相关冠状病毒 RsSHC014的RBD蛋白。所述蝙蝠SARS相关冠状病毒RsSHC014为GenBank：KC881005.1。

所述SRB4单克隆抗体的重链氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述SRB4单克隆抗体的轻链氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；

所述SRB10单克隆抗体的重链氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示，所述SRB10单克隆抗体的轻链氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示；