[发明专利]一种草莓匍匐茎生长转基因毛状根的诱导方法及其应用在审
| 申请号： | 202210206160.6 | 申请日： | 2022-02-28 |
| 公开（公告）号： | CN114561422A | 公开（公告）日： | 2022-05-31 |
| 发明（设计）人： | 郝福玲;吴沐谦;张露露;孙启涵;吴思鑫 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/74;A01G22/05;A01G7/06 |
| 代理公司： | 合肥昊晟德专利代理事务所(普通合伙) 34153 | 代理人： | 王林 |
| 地址： | 230000 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 草莓 匍匐茎 生长 转基因 毛状根 诱导 方法 及其 应用 | ||
1.一种草莓匍匐茎生长转基因毛状根的诱导方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：转基因菌液制备：用携带有pCAMBIA1302载体的K599发根农杆菌摇菌至OD600≈0.2～0.4，富集菌液，离心后用含有乙酰丁香酮的侵染液轻柔重悬，得到侵染菌液；
S2：侵染：采用步骤S1中得到的侵染菌液对盆栽草莓进行草莓匍匐茎活体注射；
S3：毛状根诱导：对步骤S2中经过活体注射后的草莓苗用湿棉花保湿，用黑塑料布覆盖，暗培养3d，得到毛状根。
2.如权利要求1所述的一种草莓匍匐茎生长转基因毛状根的诱导方法，其特征在于，所述步骤S1中离心的转速为5000r/min，离心时间为5min。
3.如权利要求1所述的一种草莓匍匐茎生长转基因毛状根的诱导方法，其特征在于，所述步骤S1侵染液包括10mmol/L的MES、10mmol/L的MgCl2、0.5mmol/L的乙酰丁香酮，采用灭菌水定容。
4.如权利要求1所述的一种草莓匍匐茎生长转基因毛状根的诱导方法，其特征在于，所述步骤S2中草莓匍匐茎活体注射是采用侵染菌液在2～3幼叶小苗的匍匐茎上端0.5～1cm内进行草莓匍匐茎活体注射。
5.如权利要求1所述的一种草莓匍匐茎生长转基因毛状根的诱导方法，其特征在于，所述步骤S2中活体注射的侵染菌液OD600为0～1。
6.如权利要求1所述的一种草莓匍匐茎生长转基因毛状根的诱导方法，其特征在于，所述步骤S3中草莓苗注射伤口处需要用一端泡在水中的纱布覆盖保湿。
7.一种如权利要求1～6任一项所述的草莓匍匐茎生长转基因毛状根的诱导方法在章姬草莓、红颜草莓、白雪公主草莓中的应用。
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