[发明专利]一种亚细胞区室化生产衣康酸的解脂耶氏酵母工程菌及应用在审
| 申请号： | 202210206191.1 | 申请日： | 2022-03-02 |
| 公开（公告）号： | CN114561309A | 公开（公告）日： | 2022-05-31 |
| 发明（设计）人： | 于爱群;荣兰新;卢志慧;王亚平;肖冬光;张翠英 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/60;C12N15/62;C12N15/81;C12P7/44;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 栗华楠 |
| 地址： | 300457 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细胞 化生 产衣康酸 解脂耶氏 酵母 工程 应用 | ||
1.一种解脂耶氏酵母基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌以解脂耶氏酵母为出发菌株，通过导入顺-乌头酸脱羧酶编码基因获得。
2.如权利要求1所述的一种解脂耶氏酵母基因工程菌，其特征在于，所述顺-乌头酸脱羧酶编码基因，其核苷酸如序列表SEQ ID NO.1所示。
3.如权利要求2所述的一种解脂耶氏酵母基因工程菌，其特征在于，所述顺-乌头酸脱羧酶编码基因是通过质粒在宿主细胞中表达。
4.如权利要求3所述的一种解脂耶氏酵母基因工程菌，其特征在于，所述质粒为pYLEX1。
5.如权利要求1所述的一种解脂耶氏酵母基因工程菌，其特征在于，所述顺-乌头酸脱羧酶编码基因通过增强型过氧化物酶体定位信号ePTS1在过氧化物酶体中进行定位表达。
6.如权利要求5所述的一种解脂耶氏酵母基因工程菌，其特征在于，将ePTS1编码基因连接到顺-乌头酸脱羧酶编码基因后，构建重组质粒pYLEX1-CAD-ePTS1，并将重组质粒导入解脂耶氏酵母出发菌株中进行表达。
7.如权利要求5所述的一种解脂耶氏酵母基因工程菌，其特征在于，所述ePTS1编码序列如序列表SEQ ID NO.2所示。
8.如权利要求1所述的一种解脂耶氏酵母基因工程菌，其特征在于，所述解脂耶氏酵母出发菌株为解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)Po1gΔku70。
9.权利要求1-8任意一项所述的一种解脂耶氏酵母基因工程菌在生产衣康酸中的应用。
10.如权利要求9所述的应用，采用所述工程菌生产衣康酸的方法如下：
将工程菌种子液按1％接种量接种至YPD培养基中，28-30℃，200-220r/min条件培养15-18h，再转接至YPO培养基中使OD600达到0.1左右，28-30℃，200-220r/min条件下发酵6天；
所述YPO培养基组成成分为：蛋白胨18-22g/L，酵母浸粉8-12g/L，厨房废油1.1-1.2％，吐温80 0.18-0.22％，余量为水，115-121℃，灭菌20min。
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