[发明专利]一种T级微生物复合菌剂及其制备方法与应用

说明书

本发明提供了一种T级微生物复合菌剂及其制备方法与应用，属于高效木质纤维素复合菌剂制备技术领域。本发明提供的T级微生物复合菌剂的制备方法，将有效活菌数为1×10⁷～1×10⁹CFU/mL的具有不同温度特点的微生物培养液等体积混合，按照梯度升温方式培养，使总有效活菌数为1×10⁷～1×10⁹CFU/mL，传代培养，将传代所得的复合菌剂按照堆肥温度进行发酵培养，筛选获得复合菌剂。本发明制备方法制备所得的复合菌剂，具有高效降解木质纤维素作用，确保优势菌株在相应的堆肥温度发挥最大化的活性并产生降解能力，使不同温度下优势菌株产生的效果犹如火箭引燃时的“T”级，不仅避免微生物之间的竞争排斥作用，而且可以快速降解堆肥各时期有机组分。

技术领域

本发明属于高效木质纤维素复合菌剂制备技术领域，尤其涉及一种T级微生物复合菌剂及其制备方法与应用。

背景技术

随着人口的增长和社会经济的发展，我国人民生活水平不断提高，农业废弃物产量也大幅度增加。若不恰当的处理农业废弃物，不仅造成资源的流失，而且对环境造成很大的影响。好氧发酵是处理农业废弃物资源化利用的主要方式，但由于微生物存在活性较弱以及微生物产酶量较低等问题，严重影响农业废弃物降解及高质资源化利用。

农业废弃物一般包含较高的木质纤维素生物质，主要是由纤维素、木质素及半纤维素连接结构组成。木质素包裹在木质纤维素生物质最外层，这不仅限制了内部纤维素和半纤维素的利用，而且较高分子量的木质纤维素酶分子很难进入纤维素内部进行利用。好氧发酵是木质纤维素组分在微生物的作用下进行分解并形成腐殖酸的过程。微生物在好氧发酵木质纤维素降解过程中扮演重要角色。筛选出具有特殊功能性微生物能打破顽固的木质纤维素结构并对外层木质素解聚，有利于酶分子与底物的结合。但是现有技术并未有关如何利用微生物解决堆肥过程中木质纤维素废弃物难降解以及降解效率低等问题的有关研究。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种制备T级微生物复合菌剂的方法，具有高效降解木质纤维素的作用，本发明方法能够确保优势菌株在相应的堆肥温度发挥最大化的活性并产生降解能力，不仅避免微生物之间的竞争排斥作用，而且可以快速降解堆肥各时期有机组分。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种高效降解木质纤维素复合菌剂的制备方法，包括如下步骤：将有效活菌数为1×10⁷～1×10⁹CFU/mL的具有不同温度特点的微生物培养液等体积混合，按照梯度升温方式培养，使总有效活菌数为1×10⁷～1×10⁹CFU/mL，传代培养，将传代所得的复合菌剂按照堆肥温度进行发酵培养，筛选获得复合菌剂。

优选的，所述梯度升温方式培养是20℃-35℃-45℃-50℃-55℃-60℃共培养5-8天。

优选的，所述不同温度特点的微生物包括耐低温微生物、常温微生物、嗜中温微生物和耐高温微生物，所述低温为20℃以下，所述常温为30℃～35℃，所述中温为40℃～50℃，所述高温为55℃以上。

优选的，耐低温特点的微生物包括耐冷杆菌和嗜冷杆菌，常温特点的微生物包括烟曲霉和解淀粉芽孢杆菌，嗜中温特点的微生物包括耐盐芽胞杆菌和产黄青霉，耐高温特点的微生物包括枯草芽孢杆菌和耐盐芽胞杆菌。

优选的，所述传代培养为按照20℃-35℃-45℃-50℃-55℃-60℃梯度升温的方式传代培养10～20代。

优选的，所述筛选包括酶活筛选和降解率筛选。

优选的，所述发酵培养为以水稻秸秆为碳源的发酵培养基进行培养。