[发明专利]一种草莓MYB转录因子FaMYB5基因的应用

说明书

本发明涉及植物分子基因工程技术领域，具体涉及一种草莓MYB转录因子FaMYB5基因的应用，通过克隆出草莓MYB转录因子FaMYB5基因以及含有上述FaMYB5基因的表达载体、宿主菌，这种FaMYB5基因能够应用于调控草莓果实中柠檬酸积累、表达CS1和GAD基因，在草莓中过量表达FaMYB5促进草莓果实柠檬酸代谢，同时柠檬酸合成主要基因CS1表达量上升和降解基因GAD表达量明显下降。

技术领域

本发明涉及植物分子基因工程技术领域，具体涉及一种草莓MYB转录因子FaMYB5基因的用。

背景技术

有机酸是果实主要的品质组成因子，直接影响草莓果实的酸度和风味。适量的酸可以使水果更可口，果实酸度的调控具有很强的经济相关性，因为它与消费者的感知有关，因此是水果产业的重要制约因素。

大多数水果中主要有机酸为柠檬酸或苹果酸，柠檬酸是草莓果实中主要有机酸类型，占总有机酸的80％以上，其含量由合成、分解代谢、运输和液泡储存之间的平衡决定。不同品种之间的柠檬酸含量存在差异，并受遗传、成熟度和栽培管理措施等因素的影响。

果实有机酸代谢是一个复杂的生物学过程，在果实发育过程中，有机酸积累主要发生在果实膨大期，而随着果实成熟进程其含量逐渐下降。此外，柠檬酸不仅响应果实风味，也参与了果实的光合作用、呼吸作用以及氨基酸、芳香物质、酯类及酚类物质的合成、衰老等众多生物学过程。因此，草莓果实柠檬酸代谢研究是果实品质生物学的重要研究内容。

鉴于上述缺陷，本发明创作者经过长时间的研究和实践终于获得了本发明。

发明内容

本发明的目的在于解决如何提高果实中的柠檬酸含量的问题，提供了一种草莓MYB转录因子FaMYB5基因的应用。

为了实现上述目的，本发明公开了一种草莓MYB转录因子FaMYB5基因在表达FaCS1和FaGAD基因中的应用，所述草莓MYB转录因子FaMYB5基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还公开了一种草莓MYB转录因子FaMYB5基因调控草莓果实中柠檬酸代谢中的应用，所述草莓MYB转录因子FaMYB5基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

一种草莓MYB转录因子FaMYB5基因调控草莓果实中柠檬酸代谢中的应用，采用注射法侵染果实。

与现有技术比较本发明的有益效果在于：本发明克隆出草莓MYB转录因子FaMYB5基因，并通过过表达转基因草莓试验发现，FaMYB5与果实柠檬酸代谢相关，将该基因过量表达后，其表达量增高，FaCS1和FaGAD主要基因表达量明显增加。可见，该FaMYB5基因在果实柠檬酸代谢中将具有广泛的应用。

附图说明

图1为草莓果实中克隆得到FaMYB5；

图2为实时定量PCR检测草莓果实注射后转录因子MYB5、合成关键基因CS2和降解基因GAD表达图；

图3为过表达注射草莓果实后柠檬酸含量的变化图。

具体实施方式

以下结合附图，对本发明上述的和另外的技术特征和优点作更详细的说明。

实施例1

以NCBI中搜索到的草莓MYB5基因序列为模板，进一步设计引物；以红颜草莓大绿期果实的cDNA为模版，以MYB5-F为上游引物，以MYB5-R为下游引物，进行PCR反应，克隆得到MYB5基因，转化pMD19-T载体，提取质粒备用。本实施例使用的红颜草莓为安徽农业大学种质资源圃采集。

一、转化步骤如下：