[发明专利]含间充质干细胞胞浆提取物的人卵母细胞体外成熟培养液及培养方法在审
申请号: | 202210211484.9 | 申请日: | 2022-02-28 |
公开(公告)号: | CN114836376A | 公开(公告)日: | 2022-08-02 |
发明(设计)人: | 童国庆;尹萍;孙宁宇;张志航;张武文;李凯;冯煜 | 申请(专利权)人: | 上海中医药大学附属曙光医院 |
主分类号: | C12N5/075 | 分类号: | C12N5/075;C12N5/0775 |
代理公司: | 上海申浩律师事务所 31280 | 代理人: | 赵建敏 |
地址: | 201203 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 含间充质 干细胞 提取物 人卵母 细胞 体外 成熟 培养液 培养 方法 | ||
1.一种含间充质干细胞胞浆提取物的人卵母细胞体外成熟培养液,其特征在于,所述的培养液是在卵母细胞基础培养液的基础上,添加75mIU/ml性激素、100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素和2×108个/ml间充质干细胞胞浆提取物。
2.根据权利要求1所述的含间充质干细胞胞浆提取物的人卵母细胞体外成熟培养液,其特征在于,所述的性激素包括促卵泡生成素和促黄体生成素,促卵泡生成素与促黄体生成素比例为1:1。
3.根据权利要求1所述的含间充质干细胞胞浆提取物的人卵母细胞体外成熟培养液,其特征在于,所述的间充质干细胞胞浆提取物,是以卵母细胞基础培养液为基准,2×108个间充质干细胞细胞在1ml卵母细胞基础培养液中在超声波仪在4℃条件下打碎,直到所有细胞和细胞核都被裂解;裂解物在4℃下以12,000rpm的速度离心15分钟,取上清液,即为所述的间充质干细胞细胞胞浆提取物。
4.一种人卵母细胞体外成熟培养方法,其特征在于,所述的培养方法是采用如权利要求1-3任一所述的含间充质干细胞胞浆提取物的人卵母细胞体外成熟培养液对未成熟卵母细胞进行体外成熟培养。
5.根据权利要求4所述的人卵母细胞体外成熟培养方法,其特征在于,所述的培养方法是在体式显微镜下捡出GV期或MI期卵母细胞,放置所述的含间充质干细胞胞浆提取物的人卵母细胞体外成熟培养液继续培养18小时至42小时。
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