[发明专利]吲哚类衍生物作为化学发光增强剂的用途以及包含该增强剂的试剂盒在审
申请号: | 202210218995.3 | 申请日: | 2022-03-08 |
公开(公告)号: | CN114755403A | 公开(公告)日: | 2022-07-15 |
发明(设计)人: | 李广亮;李民强 | 申请(专利权)人: | 大连博格林生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;G01N33/532 |
代理公司: | 苏州市方略专利代理事务所(普通合伙) 32267 | 代理人: | 陈慕禾 |
地址: | 116000 辽宁省大连市*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 吲哚 衍生物 作为 化学 发光 增强 用途 以及 包含 试剂盒 | ||
本发明属于化学发光试剂领域,公开了吲哚类衍生物作为化学发光增强剂的用途以及包含该增强剂的试剂盒。所述用途中,所述吲哚类衍生物作为第二增强剂与作为第一增强剂的吩噻嗪类化合物联合使用;进一步的,所述吩噻嗪类化合物选自3‑(10‑吩噻嗪基)丙烷‑1‑磺酸钠、10‑(3‑二甲基氨丙基)吩噻嗪及其衍生物中的一种;进一步的,所述吲哚类衍生物选自色氨酸、5‑羟色胺、生长素、或吲哚‑3‑乙酸中的一种或多种。本发明通过吩噻嗪类化合物和吲哚类衍生物的组合使用,发挥协同作用,既提高了发光试剂的亮度,同时因电子的相互传递,延长了发光时间。
技术领域
本发明属于化学发光试剂领域,公开了吲哚类衍生物作为化学发光增强剂的用途以及包含该增强剂的试剂盒。
背景技术
辣根过氧化物酶(HRP)催化的鲁米诺和过氧化合物的化学发光反应在抗原、抗体的检测分析中,尤其是在酶联免疫吸附实验(ELISA)和免疫印记实验中广泛应用。将辣根过氧化物酶偶联在抗原或抗体上,通过测定HRP的量来间接分析抗原或抗体的量。
鲁米诺作为经典的化学发光反应,已经有许多化合物成功用于增强HRP诱导的化学发光,包括:对碘苯酚、对香豆素和其他酚类增强剂,除去酚类增强剂外还有乙酰苯胺类、吩噻嗪类,其中吩噻嗪类属于较新发现的增强剂。吩噻嗪类与其余发光增强剂相比具有更强的发光强度,尤其是在添加增强剂如咪唑、4-吗啉基吡啶作为第二增强剂,也就是共增强剂时具有更强的发光强度和发光稳定性。
然而,现有的吩噻嗪类增强剂和已经报道的第二增强剂,随亮度增加幅度较大,但稳定性不佳。因此,在新的增强剂与第二增强剂理论基础上,开发新的增强剂组合仍是有必要的,以实现在不过多降低化学发光灵敏度的情况下,提高化学发光的稳定性,保证在两小时内发光强度衰减小于10%。
发明内容
针对上述情况,本发明公开了吲哚类衍生物作为化学发光增强剂的用途以及包含该增强剂的试剂盒。
本发明的技术方案如下:
吲哚类衍生物作为化学发光增强剂的用途,所述吲哚类衍生物作为第二增强剂与作为第一增强剂的吩噻嗪类化合物联合使用。
进一步的,上述用途中,所述吩噻嗪类化合物选自3-(10-吩噻嗪基)丙烷-1-磺酸钠、10-(3-二甲基氨丙基)吩噻嗪及其衍生物中的一种。
进一步的,上述用途中,所述吲哚类衍生物选自色氨酸、5-羟色胺、生长素、或吲哚-3-乙酸中的一种或多种。
进一步的,上述用途中,所述吲哚类衍生物在化学发光试剂中的终浓度在1-30mM之间。
进一步的,一种化学发光试剂,包括吩噻嗪类化合物作为第一增强剂;吲哚类衍生物作为第二增强剂;鲁米诺、异鲁米诺或鲁米诺相关衍生物作为发光底物。
进一步的,一种化学发光试剂盒,包括上述化学发光试剂。
进一步的,上述学发光试剂盒,包括A液和B液,
所述A液包括化学发光试剂、缓冲剂A和保湿剂;
所述B液包括过氧化剂、稳定剂和缓冲剂B。
进一步的,上述化学发光试剂盒,
所述A液包括:
1)、发光底物:选自鲁米诺、异鲁米诺或鲁米诺相关衍生物;
2)、第一增强剂:选自3-(10-吩噻嗪基)丙烷-1-磺酸钠、10-(3-二甲基氨丙基)吩噻嗪及其衍生物中的一种;
3)、第二增强剂:选自色氨酸、5-羟色胺、生长素、和吲哚-3-乙酸中的一种或多种;
4)、缓冲剂A:pH值8-9.5之间的缓冲液;
所述B液包括:
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