[发明专利]一种牡丹PoAGL15基因及其氨基酸序列和应用

说明书

本发明公开了一种牡丹PoAGL15基因及其氨基酸序列和应用，该基因的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示，由该基因编码的氨基酸序列如SEQIDNo.2所示。本发明提供的牡丹PoAGL15基因与体胚发生相关，会在早期胚中进行积累和表达，并且在牡丹体胚成熟后期具有重要的调控作用，能够加快牡丹离体繁育的效率。将其构建真核表达载体，转化拟南芥，能够增强拟南芥叶片愈伤组织的诱导并使叶片增大。本发明提供的牡丹PoAGL15基因及其氨基酸序列不仅可以为牡丹建立完整的植株再生和遗传转化体系提供一定的理论基础，而且可以应用到其它植物的育种中去。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种牡丹PoAGL15基因及其氨基酸序列和应用。

背景技术

AGL15(AGAMOUS-like 15)隶属于MADS-box基因家族MIKC亚族，是该家族中唯一出现在所有具有胚性的细胞组织中且会优先在植物胚(幼胚、胚乳、胚柄细胞等)和体胚发育过程中表达的基因成员。在花器官形成、花期调控、营养器官发育、种子以及体细胞胚发生中均发挥着重要作用，可以启动体细胞胚胎发生转录因子，AGL15同时参与生长素、赤霉素、乙烯等多种激素调控途径增强胚胎发生能力从而促使体细胞胚的形成，是植物体细胞胚胎发生过程中的具有研究价值的功能基因。

体细胞胚胎发生是植物离体再生的重要途径之一，是快速繁殖的有效途径，是未来牡丹组织培养的重点。尤其是不经过愈伤组织阶段的体胚直接发生成苗途径，可大大加快牡丹离体繁育的效率，为植物基因工程等研究提供良好的实验材料受体。

目前牡丹中关于花型、花色以及调控花期相关的重要基因大部分已被挖掘，而与体胚发生相关的功能基因研究鲜有报导。因此探究胚性基因AGL15功能特性以及在整个体胚直接发生过程表达的特点，对牡丹建立完整的植株再生和遗传转化体系具有重要意义。对于目前已经报道的与牡丹体胚发生相关的基因，并未发现其有增强植物叶片愈伤组织的诱导并使叶片增大的作用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种牡丹PoAGL15基因及其氨基酸序列和应用，以解决上述现有技术存在的问题，本发明提供的牡丹PoAGL15基因与体胚发生相关，会在早期胚中进行积累和表达，并且在牡丹体胚成熟后期具有重要的调控作用，将其构建真核表达载体，转化拟南芥，能够增强拟南芥叶片愈伤组织的诱导并使叶片增大。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

方案一：本发明提供一种牡丹PoAGL15基因，来源于牡丹品种‘凤丹’(P.ostii)，该基因的序列表如SEQ No.1所示。

方案二：本发明提供一种由上述牡丹PoAGL15基因编码的蛋白，其氨基酸的序列表如SEQ No.2所示。

方案三：本发明提供一种含有上述牡丹PoAGL15基因的表达盒、重组表达载体或重组微生物。

方案四：本发明提供一种上述牡丹PoAGL15基因或其编码的蛋白在植物体胚发生过程中的应用。

方案五：本发明提供一种制备转基因植物的方法，包括以下步骤：

将牡丹PoAGL15基因通过含有PoAGL15基因表达盒的重组表达载体通过使用农杆菌介导法转化植物细胞或组织，并将转化的植物组织培育成植株，得到转基因植物。

与现有技术相比，本发明公开了以下技术效果：

本发明提供了一种牡丹PoAGL15基因及其氨基酸序列和应用，该基因与牡丹体胚发生相关，会在早期胚中进行积累和表达，并且在牡丹体胚成熟后期具有重要的调控作用，能够加快牡丹离体繁育的效率，为牡丹建立完整的植株再生和遗传转化体系提供一定的理论基础。

将该基因构建真核表达载体，转化拟南芥，能够增强拟南芥叶片愈伤组织的诱导并使叶片增大，该功能的验证使牡丹PoAGL15基因及其氨基酸序列的特性能够应用到其它植物的育种中。

附图说明