[发明专利]一种BP180抗体快速检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明公开了一种高灵敏度BP180抗体快速检测试剂盒及其制备方法，所述试剂盒包括一种蛋白质，所述蛋白质的氨基酸序列中包括4个序列A和一个序列B，所述序列A的氨基酸序列是序列表中序列1的1‑79位；所述序列B的氨基酸序列是序列表中序列1的317‑404位。在本发明中，将BP180NC16A结构域和中间核心区(Aa112‑199)片段融合在一起得到的上述重组蛋白，能够识别更多的抗体，以及捕获抗体加入鼠抗人IgE，都能够提高BP180抗体的检出率。同时可以可以减少生产工艺流程，可以降低试剂盒的成本。本发明能够检测全血样本，操作方便，无需专业人员，使用者在家里即可进行操作，是一种适于自测的产品。

技术领域

本发明涉及体外诊断试剂领域，具体的说，为一种高灵敏度BP180抗体快速检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

大疱性类天疱疮(Bullous Pemphigoid,BP)是一种常见的自身免疫性大疱病。因循环血液中出现抗半桥粒蛋白BP180、BP230的致病性自身抗体，患者表现为全身水疱、大疱、糜烂、红斑。NC16A为BP180外功能区的非胶原区，是致病性免疫球蛋白IgG和IgE类自身抗体的主要靶点。常规检测方式为用重组蛋白NC16A作为标记蛋白与样本中的BP180抗体结合，然后用鼠抗人IgG作为捕获抗体检测BP180抗体，文献以及临床工作者在实践过程中验证该检测方法的检出率在70％～90％。但该类患者常是合并脑血管意外、阿尔茨海默症等高龄居家患者，常规诊断方法常要耗时1周以上获得结果，对该病的早期诊断带来延迟，家属带患就医也极不便捷，因此，迫切需要一种快速、可居家完成的快速诊断和病情评估方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高灵敏BP180抗体快速检测试剂盒及其制备方法。

本发明提供一种蛋白质，所述蛋白质的氨基酸序列中包括4个序列A和一个序列B，所述序列A的氨基酸序列是序列表中序列1的1-79位；所述序列B的氨基酸序列是序列表中序列1的317-404位。

其中，所述蛋白质为如下A1)至A6)任一所述的蛋白质：

A1)氨基酸序列是序列表中序列1的第1-404位的蛋白质；

A2)氨基酸序列是序列表中序列2的第1-404位的蛋白质；

A3)氨基酸序列是序列表中序列3的第1-404位的蛋白质；

A4)氨基酸序列是序列表中序列4的第1-404位的蛋白质；

A5)氨基酸序列是序列表中序列5的第1-404位的蛋白质；

A6)在A1)-A5)任一所述蛋白质的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质。

其中，所述融合蛋白质为在在A1)-A5)任一所述蛋白质的C末端连接his标签的蛋白质。

本发明还要求保护所述蛋白质相关的生物材料，为下述B1)至B4)中的任一种：

B1)编码上述蛋白质的核酸分子；

B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；

B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体；

B4)含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物。

其中，B1)所述核酸分子为如下b1)-b5)任一所示的所述蛋白质的编码基因：

b1)编码序列是序列表中序列6的第1-1212核苷酸的cDNA分子；

b2)编码序列是序列表中序列7的1-1212核苷酸的cDNA分子；