[发明专利]一种可重复利用固定化漆酶去除水土多环芳烃的方法

权利要求书

1.一种可重复利用固定化漆酶去除水土多环芳烃的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、通过溶胶-凝胶法合成具备磁性内核的Fe₃O₄@SiO₂颗粒，利用共沉淀法将壳聚糖包裹于Fe₃O₄@SiO₂颗粒表面，形成Fe₃O₄@SiO₂-壳聚糖固定化漆酶载体，以戊二醛为交联剂，将游离漆酶固定至Fe₃O₄@SiO₂-壳聚糖固定化漆酶载体上，形成固定化漆酶；

S2、将上述固定化漆酶加入含有多环芳烃的水土中，反应40-50h；

S3、利用磁力分离固定化漆酶，经缓冲液清洗后加入含有多环芳烃的水土反应体系，考察回收的固定化漆酶对多环芳烃的去除效率；

S4、重复步骤S2和S3的处理过程，即可实现漆酶的重复使用。

2.根据权利要求1所述的一种可重复利用固定化漆酶去除水土多环芳烃的方法，其特征在于，所述步骤S1中，溶胶-凝胶法合成具备磁性内核的Fe₃O₄@SiO₂颗粒的具体过程为：按照固液比5mg：4mL：1mL的比例将Fe₃O₄纳米颗粒、乙醇以及超纯水混合均匀，并通过超声将Fe₃O₄纳米颗粒分散开，然后加入1-3mL氨水和1-2mL正硅酸四乙酯，在摇床中充分振荡5-7h，使Fe₃O₄纳米颗粒表面形成一层SiO₂包覆层，然后采用磁力分离的方法进行固液分离后，并分别用水和乙醇将分离后的固体颗粒交替洗涤3次，即可得到Fe₃O₄@SiO₂颗粒。

3.根据权利要求1所述的一种可重复利用固定化漆酶去除水土多环芳烃的方法，其特征在于，所述步骤S1中，Fe₃O₄@SiO₂-壳聚糖固定化漆酶载体的制备过程为：按照固液比为10mg：1mL的比例将壳聚糖和乙酸水溶液中混合均匀后，得到壳聚糖水溶液，然后，按照固液比为10mg：1mL的比例将Fe₃O₄@SiO₂颗粒与去离子水混合均匀并超声分散，再缓慢滴加到上述制备壳聚糖水溶液中，在摇床中充分振荡2-4h，以获得Fe₃O₄@SiO₂-壳聚糖固定化漆酶载体，其中，乙酸水溶液的质量分数为2％。

4.根据权利要求1所述的一种可重复利用固定化漆酶去除水土多环芳烃的方法，其特征在于，所述步骤S1中，固定化漆酶的制备过程为：

S1-1、Fe₃O₄@SiO₂-壳聚糖固定化漆酶载体活化

按照固液比为5mg：1mL的比例将Fe₃O₄@SiO₂-壳聚糖固定化漆酶载体和浓度为0-10wt％的戊二醛溶液混合均匀后，放入摇床中以150-250rpm的转速振荡1-7h，然后利用磁力分离将Fe₃O₄@SiO₂-壳聚糖固定化漆酶载体颗粒从体系中分离出来，用去离子水反复洗涤载体表面，将Fe₃O₄@SiO₂-壳聚糖固定化漆酶载体表面未交联上的戊二醛溶液冲洗掉；

S1-2、游离漆酶的固定

按照固液比为5mg：1mL的比例将活化后的Fe₃O₄@SiO₂-壳聚糖颗粒与漆酶溶液混合均匀后，重新放入摇床中以150-250rpm的转速振荡1-10h，将游离漆酶固定至Fe₃O₄@SiO₂-壳聚糖固定化漆酶载体上，得到固定化漆酶，其中，漆酶溶液的浓度为0.2-1.4mg/mL。