[发明专利]一种线性范围可调、聚多巴胺介导的免修饰便携式电导率免疫传感器的构建方法及应用

权利要求书

1.一种线性范围可调、聚多巴胺介导的免修饰便携式电导率免疫传感器的构建方法，以小分子为例，其特征在于，包括以下步骤：

S1-A方案1：当待测目标物的浓度为高于10 ng/mL时，选用方案A作为检测方案，包括以下步骤：

S1-A.1在磁珠表面偶联生物识别分子A，得到偶联待测物特异性生物识别分子A的磁珠载体，在铂金纳米颗粒表面偶联生物识别分子B，得到偶联待测物特异性生物识别分子B的铂金纳米颗粒载体；

S1-A.2使偶联待测物特异性生物识别分子A的磁珠载体、偶联待测物特异性生物识别分子B的金纳米颗粒载体和待测物发生特异性识别反应；

S1-A.3向反应后的混合液中加入过氧化氢和盐酸多巴胺的混合溶液，进行铂金纳米颗粒的催化反应，催化反应完成后，磁分离弃去上清液，使用纯水洗涤复合物；

S1-A.4向洗涤后的复合物中注入铜离子溶液进行吸附反应，吸附反应完成后，磁分离收集上清液，使用电导率仪检测其电导率值，通过电导率值的变化来间接得到待测目标物的含量；

S1-B方案2：当待测目标物的浓度为10ng/mL以下时，选用方案B作为检测方案，包括以下步骤：

S1-B.1在磁珠表面偶联生物识别分子A，得到偶联待测物特异性生物识别分子A的磁珠载体，在在铂金纳米颗粒表面修饰点击试剂分子Ⅱ，得到修饰点击试剂分子Ⅱ的铂金纳米颗粒载体；

S1-B.2使偶联待测物特异性生物识别分子A的磁珠载体、制备好的点击试剂Ⅰ修饰的生物识别分子B进行免疫反应，形成免疫复合物；

S1-B.3再向步骤S1-B.2中形成的免疫复合物中加入修饰点击试剂分子Ⅱ的铂金纳米颗粒载体，通过点击反应，进一步形成复合物；

S1-B.4向反应后的混合液中加入过氧化氢和盐酸多巴胺的混合溶液，进行催化反应，催化反应完成后磁分离弃去上清液，使用纯水洗涤复合物；

S1-B.5向洗涤后的复合物中注入铜离子溶液进行吸附反应，吸附反应完成后，磁分离收集上清液，使用电导率仪检测其电导率值，通过电导率值的变化来间接得到待测目标物的含量。

2.根据权利要求1所述线性范围可调、聚多巴胺介导的免修饰便携式电导率免疫传感器的构建方法，其特征在于：所述生物识别分子A和生物识别分子B可以分别为捕获抗体和检测抗体、检测抗体和捕获抗体、抗体和完全抗原、完全抗原和抗体、DNA捕获探针和DNA检测探针或DNA检测探针和DNA捕获探针。

3.根据权利要求2所述线性范围可调、聚多巴胺介导的免修饰便携式电导率免疫传感器的构建方法，其特征在于：所述生物识别分子A和生物识别分子B的浓度为1-20μg/mL。

4.根据权利要求1所述线性范围可调、聚多巴胺介导的免修饰便携式电导率免疫传感器的构建方法，其特征在于：S1-A.3及S1-B.4所述盐酸多巴胺溶液的浓度为5-50 mM。

5.根据权利要求1所述线性范围可调、聚多巴胺介导的免修饰便携式电导率免疫传感器的构建方法，其特征在于：S1-A.3或S1-B.4中的催化反应时间范围是5-30min，温度范围是35-40℃。

6.根据权利要求1所述线性范围可调、聚多巴胺介导的免修饰便携式电导率免疫传感器的构建方法，其特征在于：所述铂金纳米颗粒溶液，其浓度为1-100μg/mL。

7.根据权利要求1所述线性范围可调、聚多巴胺介导的免修饰便携式电导率免疫传感器的构建方法，其特征在于：所述待测目标物为小分子物质和大分子物质，小分子物质时，所述待测目标物为真菌毒素或抗生素；当为大分子物质时，所述待测目标物为炎症标志物、细菌和病毒。

8.权利要求1-7任意一项所述线性范围可调、聚多巴胺介导的免修饰便携式电导率免疫传感器的构建方法的应用，其特征在于：所述方法应用于食品安全、环境监测或体外诊断的检测。