[发明专利]快速鉴别木质素降解菌的方法在审
申请号: | 202210225894.9 | 申请日: | 2022-03-09 |
公开(公告)号: | CN114703249A | 公开(公告)日: | 2022-07-05 |
发明(设计)人: | 林璐;杨敏 | 申请(专利权)人: | 山东大学 |
主分类号: | C12Q1/04 | 分类号: | C12Q1/04;C12Q1/28;C12Q1/26 |
代理公司: | 青岛汇智海纳知识产权代理有限公司 37335 | 代理人: | 陈磊 |
地址: | 266000 山东省青岛市即墨*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 快速 鉴别 木质素 降解 方法 | ||
1.一种快速鉴别木质素降解菌的方法,其特征在于:取待检测菌株,接种至培养基,培养至对数期,测定其OD600值和胞外木质素降解酶的活性,将检测数值代入多元判别函数,进行计算和比较,根据比较结果,预测待检测菌株是否具有降解木质素的能力。
2.根据权利要求1所述的快速鉴别木质素降解菌的方法,其特征在于:所述胞外木质素降解酶,选自染料脱色过氧化物酶,锰过氧化物酶,木质素过氧化物酶,漆酶中的任意一种或两种以上。
3.根据权利要求2所述的快速鉴别木质素降解菌的方法,其特征在于:所述胞外木质素降解酶,选自染料脱色过氧化物酶。
4.根据权利要求1所述的快速鉴别木质素降解菌的方法,其特征在于:所述测定DyP、LAC的活性所采用的方法为2,6-DMP测定法。
5.根据权利要求1所述的快速鉴别木质素降解菌的方法,其特征在于:所述多元判别函数是通过以下方式建立的:取N1株木质素利用菌株、N2株非木质素利用菌株,其中,N1、N2均为大于等于10的自然数;将各菌株分别接种至培养基,培养至对数期,测定其OD600值和胞外木质素降解酶的活性;将OD600值和胞外木质素降解酶的活性作为变量进行多元判别函数分析,结合检测数值,得到多元判别函数。
6.根据权利要求1或5所述的快速鉴别木质素降解菌的方法,其特征在于:所述多元判别函数具体如下:
Y1=0.659×DyP+7.658×MnP+4.888×LiP+0.843×OD600+6.623×Laccase-2.754;
Y2=-0.041×DyP+2.055×MnP+0.400×LiP+1.924×OD600-1.309×Laccase-4.887;
其中,DyP是指待检测菌株的染料脱色过氧化物酶的活性,单位U/L;MnP是指待检测菌株的锰过氧化物酶的活性,单位U/L;LiP是指待检测菌株的木质素过氧化物酶的活性,单位U/L;OD600是指待检测菌株的OD600值;Laccase是指待检测菌株的漆酶的活性,单位U/L;
将待检测菌株的检测数值代入多元判别函数,计算得到Y1值和Y2值,比较Y1值和Y2值的大小,若Y1>Y2,则预测该待检测菌株为木质素利用菌株;若Y1≤Y2,则预测该待检测菌株为非木质素利用菌株。
7.根据权利要求1或5所述的快速鉴别木质素降解菌的方法,其特征在于:所述多元判别函数具体如下:
Y1(木质素利用菌株)=0.592×DyP+0.874×OD600-1.890;
Y2(非木质素利用菌株)=-0.051×DyP+1.920×OD600-4.844;
其中,DyP是指待检测菌株的染料脱色过氧化物酶的活性,单位U/L;OD600是指待检测菌株的OD600值;
将待检测菌株的检测数值代入多元判别函数,计算得到Y1值和Y2值,比较Y1值和Y2值的大小,若Y1>Y2,则预测该待检测菌株为木质素利用菌株;若Y1≤Y2,则预测该待检测菌株为非木质素利用菌株。
8.根据权利要求1所述的快速鉴别木质素降解菌的方法,其特征在于:所述待检测菌株、木质素利用菌株、非木质素利用菌株,均选自海洋细菌。
9.一种预测芽孢杆菌属菌株和/或弧菌属菌株的木质素降解能力的方法,其特征在于,通过以下公式计算木质素降解率:
木质素降解率(%)=(2.675E-12×CFUmax-0.113×DyP+0.210)×100;
其中,CFUmax指最大生长量;DyP是指菌株的染料脱色过氧化物酶的活性,单位U/L。
10.一种预测芽孢杆菌属菌株和/或弧菌属菌株的木质素降解能力的方法,其特征在于,通过以下公式计算木质素降解率:
木质素降解率(%)=(2.092E-12×CFUmax+3.146E-05×ROS-0.007×DyP+0.180)×100;
其中,CFUmax指最大生长量;ROS指胞外活性氧的浓度;DyP是指菌株的染料脱色过氧化物酶的活性,单位U/L。
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