[发明专利]一种检测甲醛和硫化氢双组分的荧光探针、检测方法及其应用

权利要求书

1.一种基于比色和荧光双模式检测甲醛和硫化氢的检测方法，采用同时检测甲醛和硫化氢的荧光探针，其分子式为：C₂₆H₂₄N₄，所述的荧光探针以AIE分子四苯基乙烯为荧光团，以氨基为识别基团，缩写为TPE-4NH₂；其结构式如下所示：

其特征在于，所述的检测方法的步骤如下：

(1)以DMSO为溶剂配制浓度为2mM的TPE-4NH₂探针母液；配制pH＝7.4、浓度为10mM的PBS缓冲溶液，并用该缓冲溶液配制不同浓度的甲醛和硫化氢溶液；

(2)用DMSO将TPE-4NH₂探针母液稀释到500μM；配制H₂O与DMSO体积比为0％～90％的探针溶液，室温放置10～30min后，用酶标仪进行记录，得到不同体积分数下荧光探针的荧光曲线；

(3)用DMSO将探针母液稀释到100μM；加入不同pH值10mM的PBS缓冲溶液、探针溶液和甲醛溶液，体积比为8:1:1，在37℃恒温箱中放置30～60min后，用酶标仪进行记录，得到不同pH条件下荧光强度曲线；同理，在最优的pH缓冲液中，记录不同时间下的荧光强度，得到不同反应时间下荧光强度曲线，进一步得到探针检测甲醛的最优条件；

(4)用DMSO将探针母液稀释到100μM；加入pH值为7.4、10mM的PBS缓冲溶液、探针溶液和一定浓度的甲醛溶液，体积比为8:1:1，在37℃恒温箱中放置30～60min后，溶液荧光增强，用酶标仪进行记录，得到基于甲醛浓度的工作曲线；

(5)用DMSO将探针母液稀释到500μM；加入pH值为7.4、10mM的PBS缓冲溶液、探针溶液、硝酸银溶液和一定浓度的硫化氢溶液，体积比为7:1:1:1，在室温放置10～30min后，用酶标仪进行记录，得到基于硫化氢浓度的工作曲线。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，该荧光探针的激发波长为365nm，随着甲醛的浓度升高，其在526nm处的荧光峰值逐渐增强，是一种荧光增强型探针；借助银离子的氧化作用，还可用于硫化氢的检测，其激发波长为365nm，随着硫化氢的浓度升高，其在490nm处的荧光峰值逐渐增强，且溶液颜色由绿色逐渐变为无色，是一种比色和荧光双模式识别硫化氢的荧光探针。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，检测甲醛的浓度线性范围为60-4000μM，最低检出限为1.04μM；检测硫化氢的浓度线性范围为15-50μM，最低检出限为1.1μM。