[发明专利]一种白檀组织培养的培养基及其组织培养方法有效
申请号: | 202210235518.8 | 申请日: | 2022-03-11 |
公开(公告)号: | CN114731950B | 公开(公告)日: | 2023-01-24 |
发明(设计)人: | 咸洋;韩彪;解孝满;徐慧;张继良;赵立军;乔婕;董昕;王磊;崔程程 | 申请(专利权)人: | 山东省林草种质资源中心(山东省药乡林场) |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04;A01H4/00 |
代理公司: | 北京弘权知识产权代理有限公司 11363 | 代理人: | 逯长明;许伟群 |
地址: | 250102 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 白檀 组织培养 培养基 及其 方法 | ||
1.一种白檀组织培养的培养基,其特征在于,由改良MS培养基、植物生长调节剂、硝酸钙、蔗糖和琼脂组成,所述改良MS培养基各组分的含量为:
硝酸钾1900 mg/L ;硝酸铵1650 mg/L;磷酸二氢钾170 mg/L;七水硫酸镁370 mg/L;二水氯化钙440 mg/L;碘化钾0.83 mg/L;硼酸6.2 mg/L ;四水硫酸锰 22.3 mg/L;硫酸锌8.6mg/L;钼酸钠0.25 mg/L;硫酸铜0.025 mg/L;氯化钴0.025 mg/L;乙二胺四乙酸二钠26.11mg/L;硫酸亚铁19.46 mg/L;肌醇100 mg/L;甘氨酸 2 mg/L;盐酸硫胺素0.1 mg/L;盐酸吡哆醇0.5 mg/L;烟酸0.5 mg/L,所述蔗糖含量为30g/L;所述琼脂的含量为6.0 g/L,作为固体MS培养基的凝固剂,所述培养基的pH值调整为5.8-6.0,所述植物生长调节剂为6-苄氨基嘌呤和激动素,所述6-苄氨基嘌呤质量浓度为1.1-1.3mg/L,所述激动素的含量为0.1mg/L,所述硝酸钙含量为0.16-0.2mg/L。
2.一种白檀的组织培养方法,其特征在于,包括:
取白檀种子,清洗后依次使用酒精消毒、次氯酸钠溶液浸泡、无菌水浸泡和冲洗,以获得消毒的种子;
将消毒后的种子,接种至白檀组织培养的培养基上;
在白檀组织培养的培养基上,对无菌种子进行萌发培养,获得无菌组培苗,所述白檀组织培养的培养基为权利要求1所述的培养基;
将无菌组培苗切成2-3cm的茎段,每个所述茎段上都带有至少1对腋芽,接种至白檀组织培养的培养基上进行组培苗继代培养。
3.如权利要求2所述的培养方法,其特征在于,所述酒精消毒使用的酒精浓度为75%,消毒时间为30s。
4.如权利要求3所述的培养方法,其特征在于,所述次氯酸钠溶液浓度为3%-5%,所述白檀种子的浸泡时间为5-10min。
5.如权利要求4所述的培养方法,其特征在于,所述种子萌发培养的条件为:在无菌培养室进行培养,光强5000Lux,光照时间16h/d,温度光照时25℃,黑暗时18℃。
6.如权利要求5所述的培养方法,其特征在于,所述组培苗继代培养的培养条件为:在无菌培养室进行培养,光强5000Lux,光照时间16h/d,温度光照时25℃,黑暗时18℃。
7.如权利要求6所述的培养方法,其特征在于,所述培养基在121℃条件下灭菌,灭菌时间为18min。
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