[发明专利]一种基于SCAR-PCR技术在天敌肠道检测入侵害虫稻水象甲的方法在审
| 申请号： | 202210237597.6 | 申请日： | 2022-03-10 |
| 公开（公告）号： | CN114717327A | 公开（公告）日： | 2022-07-08 |
| 发明（设计）人： | 袁龙宇;雷浩霖;肖汉祥;李燕芳;张振飞 | 申请（专利权）人： | 广东省农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 肖云 |
| 地址： | 510640 广东省广州市五*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 scar pcr 技术 天敌 肠道 检测 入侵 害虫 稻水象甲 方法 | ||
1.一组用于检测稻水象甲的引物组，其特征在于，包括核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的SCAR引物LO-COI-F和LO-COI-R。
2.一种试剂，其特征在于，所述试剂含有权利要求1所述的引物组。
3.权利要求1所述的引物组或权利要求2所述的试剂在制备检测稻水象甲的产品中的应用。
4.一种检测稻水象甲入侵情况的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：提取待测物种样品的基因组DNA；
S2：利用权利要求1所述的SCAR引物对LO-COI-F/R，对所述基因组DNA进行SCAR-PCR反应，即得反应产物1；
S3：利用权利要求1所述的SCAR引物对LO-COI-F/R，对所述步骤S2中的所述反应产物1进行SCAR-PCR反应，即得反应产物2；
S4：取5μL所述步骤S3中的所述反应产物2在琼脂糖凝胶中进行电泳，并分析电泳结果，判断稻水象甲的入侵情况；
所述待测物种为稻水象甲的天敌。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤S1中，所述待测物种样品为所述待测物种的腹部组织或整头所述待测物种；优选为该物种的腹部组织。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述腹部组织的前处理方法为：保持在液氮环境中研磨所述腹部组织。
7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤S2中，所述SCAR-PCR反应的反应体系为：
8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤S2中，所述SCAR-PCR反应的扩增程序为：94℃5min；94℃30s，60℃30s，72℃30s，30个循环；72℃5min。
9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤S3中，所述SCAR-PCR反应的反应体系为：
10.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤S4中，所述电泳结果的分析方法为：如果显示有大小约为246bp的条带，则判断有稻水象甲入侵；如果没有大小约为246bp的条带，则判断没有稻水象甲入侵。
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