[发明专利]一种促进银杏黄酮醇苷合成的基因GbF3′H及其载体、蛋白、和应用有效
申请号: | 202210244250.4 | 申请日: | 2022-03-11 |
公开(公告)号: | CN114480448B | 公开(公告)日: | 2023-06-20 |
发明(设计)人: | 陆金凯;褚伊萱;王莉;刘思安;王庆杰;江洋;茅丹阳 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
主分类号: | C12N15/53 | 分类号: | C12N15/53;C12N9/02;C12N15/84;A01H7/00;C12N1/21;C12R1/01 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 孙斌 |
地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 促进 银杏 黄酮 合成 基因 gbf3 及其 载体 蛋白 应用 | ||
1.一种促进银杏黄酮醇苷合成的基因GbF3'H,其特征在于,所述基因GbF3'H的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的促进银杏黄酮醇苷合成的基因GbF3'H,其特征在于,用于扩增所述基因GbF3'H的引物对为SEQ ID NO.2:ATGTCTTCTCTGGAGTTCAAT和SEQ ID NO.3:AAGGCGGTTCATGTCTAA。
3.一种权利要求1所述的促进银杏黄酮醇苷合成的基因GbF3'H表达的蛋白,其特征在于,所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
4.一种含有权利要求1所述的促进银杏黄酮醇苷合成的基因GbF3'H的表达载体。
5.根据权利要求4所述的表达载体,其特征在于,所述表达载体在基因GbF3'H的5’端组装了组成型启动子CaMV35S,在基因GbF3'H的3’端组装了NOS-terminator。
6.根据权利要求4所述的表达载体,其特征在于,所述表达载体组装有NPTⅡ基因表达盒,作为转基因银杏的筛选标记,用卡那霉素进行转基因银杏的筛选。
7.根据权利要求4所述的表达载体,其特征在于,所述表达载体上组装有LB和RB序列,促使组装于其间的基因GbF3'H表达框架和筛选标记基因NPTⅡ整合至银杏染色体中。
8.一种含有权利要求1所述的促进银杏黄酮醇苷合成的基因GbF3'H或者权利要求4所述表达载体的宿主菌。
9.一种权利要求1所述的促进银杏黄酮醇苷合成的基因GbF3'H或者权利要求3所述的蛋白在促进银杏黄酮醇苷合成中的应用,所述黄酮醇苷为槲皮素,山奈酚和异鼠李素中任意一种或者多种。
10.根据权利要求9的应用,其特征在于,所述促进银杏黄酮醇苷合成的过程为:以银杏叶片为材料,克隆基因GbF3'H,将该基因构建到过量表达载体PRI 101上,构建获得重组载体,将重组载体转化到农杆菌中,再将银杏愈伤组织浸泡在农杆菌重悬液中进行银杏的遗传转化,在启动子CaMV35S的驱动下,GbF3'H可在银杏体内高效表达,从而促进黄酮醇苷的合成。
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