[发明专利]一种YH66_09125基因突变的重组菌及其在制备精氨酸中的应用

说明书

本发明公开了一种YH66_09125基因突变的重组菌及其在制备精氨酸中的应用。本发明公开的YH66_09125突变体是将YH66_09125蛋白质第176位氨基酸残基由甘氨酸突变为谷氨酸得到的蛋白质。本发明首先通过对YH66_09125基因进行单点突变得到YH66_09125^G527A，然后通过对构建的YH66_09125或突变基因的过表达重组菌以及YH66_09125敲除重组菌进行发酵培养发现，YH66_09125基因或其突变基因可以调控细菌L‑精氨酸产量。本发明首次发现YH66_09125基因参与精氨酸的生物合成，对于培育高产、高质量菌种，以及精氨酸工业化生产具有重大的应用价值。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种YH66_09125基因突变的重组菌及其在制备精氨酸中的应用。

背景技术

精氨酸是人体必需的一种氨基酸，存在于多种动物类食物中。精氨酸在医药、营养保健、食品等领域应用广泛，需求量大，被称之为氨基酸中最重要的品种之一。L-精氨酸是生物体尿素循环的重要中间代谢产物，所有的机体组织都利用L-精氨酸合成细胞浆蛋白和核蛋白。在生理活性方面，除了与生长激素、胰岛素、胰高血糖素等激素诱导有关外，近年来，又作为血管舒张因子而引起关注，有望成为营养疗法的新材料。

目前已被报道的精氨酸生产菌株主要有钝齿棒状杆菌、谷氨酸棒状杆菌、大肠杆菌、酿酒酵母、黄色短杆菌等。虽然已被报道的部分精氨酸生产菌株已经具备了较为优良的发酵性能，但是，鉴于精氨酸重要的应用价值和巨大的市场需求，寻求发酵性能更为优良的精氨酸生产菌株仍然是所有研究开发工作的基础，更是各精氨酸生产厂家增加自身市场竞争力的重中之重。

发明内容

第一方面，本发明保护一种YH66_09125突变体。

本发明保护的YH66_09125突变体是将YH66_09125蛋白质第176位氨基酸残基由甘氨酸突变为其他氨基酸残基得到的蛋白质；

所述YH66_09125蛋白质为如下A1)-A3)中的任一种：

A1)SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

A2)将A1)所示的氨基酸序列经过除第176位氨基酸残基以外的一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与细菌产精氨酸相关的蛋白质；

A3)来源于细菌且与A1)或A2)具有95％以上同一性且与细菌产精氨酸相关的蛋白质。

上述A2)所述的蛋白质中，所述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。

上述A3)所述的蛋白质中，这里使用的术语“同一性”指与天然氨基酸序列的序列相似性。“同一性”包括与本发明的SEQ ID No.2所示的氨基酸序列具有95％或更高，或96％或更高，或 97％或更高，或98％或更高，或99％或更高同一性的氨基酸序列。同一性可以用肉眼或计算机软件进行评价。使用计算机软件，两个或多个序列之间的同一性可以用百分比(％)表示，其可以用来评价相关序列之间的同一性。

上述A1)或A2)或A3)所述的蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。

进一步的，所述YH66_09125突变体是将YH66_09125蛋白质第176位氨基酸残基由甘氨酸突变为谷氨酸得到的蛋白质(对应本发明实施例中的YH66_09125^G527A蛋白质)。

更进一步的，所述YH66_09125突变体(YH66_09125^G527A蛋白质)是SEQ ID No.4所示的氨基酸序列组成的蛋白质。

第二方面，本发明保护与YH66_09125突变体相关的生物材料。