[发明专利]一种毛细管电泳安培法同时检测烟草中烟碱和酚类物质的方法

说明书

本发明公开了一种毛细管电泳安培法同时检测烟草中烟碱和酚类物质的方法，包括如下步骤：(1)制备烟草检测液；(2)将烟草检测液中的烟碱和酚类物质使用毛细管分离；(3)毛细管电泳安培法同时检测烟草中烟碱和酚类物。本发明的方法可同时检测烟草中烟碱和酚类物质，具有灵敏度高、分析速度快、选择性和重现性好的优点，在烟草质量控制和烟草化学研究中有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属烟草化学技术领域，具体涉及一种毛细管电泳安培法同时检测烟草中烟碱和酚类物质的方法。

背景技术

烟草，别称烟或烟叶，是茄科烟草属植物烟草Nicotiana tobacum L.的干燥全草，秋季按叶片成熟度，由下往上陆续采收，晒干或烘干后可做药用，也可鲜用。其不仅是烟草工业的中药原料，也是一种中草药。根据《中华本草》记载，烟草具有行气止痛、消肿、燥湿和杀虫解毒等功效。主治疥癣、食滞饱胀、毒蛇咬伤、气结疼痛、湿疹扭挫伤等。其含有众多生物活性物质，如生物碱、酚类物质、黄酮、酚酸、氨基酸、蛋白质等，其含量和烟草的质量和疗效息息相关。烟草也是提取药用烟碱、绿原酸等活性成分的重要原料。

烟草中含有多种生物碱，其中烟碱又名尼古丁，含量最高，约占烟草生物碱总量的95％。其化学名称为1-甲基-2-(2-吡啶基)吡咯烷，是烟草成瘾性的主要物质基础，也是烟草及其制品质量控制的主要指标，烟碱含量的高低不仅关系到烟草制品的质量，而且关系到人体健康。将其提取出来可用于制药或配置电子烟烟油。此外，烟草中还含有众多的酚类物质，如酚酸、黄酮等，主要有芦丁、绿原酸、槲皮素、阿魏酸、没食子酸和原儿茶酸等。研究表明，酚类物质是烤烟生长发育和采后制品品质的重要物质，在烟草生长、调制特性、烟草色泽、烟气香吃味和烟气生理强度等方面起作用，是研究和衡量烟草品质的主要因素。通常，较高等级的烟草，其酚类为物质含量较高。酚类物质的含量范围较宽，占烟叶干重的0.52～6.04％。目前检测烟草及其制品中烟碱和酚类物质主要采用高效液相色谱法和气相色谱法，分析方法复杂，分析成本较高，且不能同时检测。所以，建立能同时检测烟草中烟碱和酚类物质的快速简便的分析方法具有十分主要的实际意义。

毛细管电泳是一种在毛细管中的直流电场中进行样品电泳分离分析的微流控分析方法，其以微管道为特征，优点在于柱效高、分析速度较快、进样体积小和毛细管极易清洗等，进样量为几纳升级，节省样品和试剂。因毛细管内径通道尺寸微小，需要高灵敏度的检测手段，毛细管电泳常采用紫外检测器和激光诱导荧光检测器。常用的分离毛细管内径通常小于100μm，紫外吸收光程短，检测灵敏度不高。对无紫外吸收和非荧光或不易衍生的物质就需使用其它检测技术，如电化学和质谱检测等。电化学检测技术具有灵敏度高、选择性好、死体积小、成本低、电极及控制仪器小巧易集成的优点，主要包括安培检测、电位检测和电导检测法，其中最常用的安培检测法通过将恒定的电位施加在检测电极上，通过测量被测物在电极上发生氧化或还原产生的与浓度有关的电流信号来完成检测，但将毛细管电泳电化学检测技术用于烟草中烟碱和酚类物质的同时检测，尚未见文献报道。烟草中烟碱、芦丁、绿原酸、槲皮素、阿魏酸、没食子酸和原儿茶酸等烟碱和酚类物质均为电化学活性物质，采用毛细管电泳安培检测可提高检测灵敏度。由于非电化学活性物质不被检测，方法具有选择性，可简化获得简化的毛细管电泳图谱，降低共存物质对分析结果的干扰。

本发明建立了一种用于烟草中烟碱和酚类物质同时检测的毛细管电泳电化学分析新方法，具有检测灵敏度高、选择性好、分离分析速度快、分析成本低、样品处理简单、方法选择性好等优点，可满足烟草实际样品中烟碱和酚类物质的快速分析，在烟草质量控制和烟草化学研究中有广阔的应用前景。

发明内容

本发明的目的在于提出一种毛细管电泳安培法同时检测烟草中烟碱和酚类物质的方法。

本发明的技术方案如下：

一种毛细管电泳安培法同时检测烟草中烟碱和酚类物质的方法，包括如下步骤：

(1)制备烟草检测液；

(2)将步骤(1)的烟草检测液中的烟碱和酚类物质使用毛细管分离；