[发明专利]一种蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽及其应用

说明书

本发明公开了一种海藻来源的蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽及其制备方法，包括：将螺旋藻粉加水混匀，搅拌溶胀，加入木瓜蛋白酶，酶解，离心去除沉淀，上清液分别使用Sephadex G‑15凝胶柱和EclipseXDB‑C18柱分离，组分冻干得多肽，其氨基酸序列为：Gln‑Val‑His‑Gly‑Ile‑Ser‑Pro‑Pro‑Asp‑Ser‑Thr‑Lys。实验结果表明，本发明的多肽QVHGISPPDSTK在体外显示较高的PTP1B抑制作用，在2型糖尿病小鼠模型中具有良好的降血糖效果。此外，本发明还提供一种蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽在制备降血糖药品和降血糖保健品中的应用。

技术领域

本发明涉及生物活性肽技术领域，尤其涉及一种蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽及其在降血糖制品中的应用。

背景技术

糖尿病是一种慢性内分泌代谢疾病，其中2型糖尿病占糖尿病患者90％以上。2型糖尿病(旧称非胰岛素依赖型糖尿病，是一种慢性代谢疾病，多在35～40岁之后发病，特征为高血糖、相对缺乏胰岛素、胰岛素抵抗等。目前用于治疗2型糖尿病的药物主要有双胍类、磺脲类、α-糖苷酶抑制和噻唑烷二酮类等，由于它们多是针对病症而不是针对病因分子靶点药物的设计，因而存在各种弊端。因此，市场急需安全有效、价格合理且能长期安全服用的降糖药物。

胰岛素抵抗是2型糖尿病发病的关键因素。蛋白质酪氨酸磷酸酶(PTPs)是一类信号传导酶，它们通过调节细胞内酪氨酸的磷酸化水平来控制细胞的成长、分化、代谢；细胞迁移、基因转录、离子通道开闭、免疫反应、细胞凋亡以及成骨发育也受到PTPs的调控。PTPs紊乱可导致多种疾病，如癌症、糖尿病、肥胖症和骨质疏松症。PTP酶家族中，蛋白质酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)可通过对胰岛素受体底物-1(IRS-1)和胰岛素受体底物-2(IRS-2)的脱磷酸化作用下调胰岛素信号，故而PTP1B是开发新抗糖尿病药物的作用靶点。

PTP1B在胰岛素信号转导通路中起着重要的负调控作用。研究证实，在胰岛素敏感细胞中应用PTP1B抑制剂可使胰岛素受体及其底物磷酸化水平升高，促进葡萄糖转运子易位及增加葡萄糖的摄取等，PTP1B抑制剂起到了胰岛素类似物和胰岛素增敏剂的作用。敲除PTP1B基因或用反义核苷酸(ASO)抑制体内PTP1B蛋白及mRNA的表达，不仅可以显著提高受试小鼠对胰岛素的敏感性，而且能够明显降低肥胖症的患者几率。大量研究证实PTP1B在胰岛素信号转导中的负调控作用，它的活性增高，可能是发生胰岛素抵抗和胰岛素受体信号受损的一个致病因素。因此，寻找小分子PTP1B抑制剂已成为治疗T2DM的新靶点。

目前已经有多种从海洋藻类中筛选出具有抗氧化、抗肿瘤、ACE抑制作用的多肽，但是目前还很少有关于海藻来源的PTP1B抑制肽的报道。

发明内容

本发明解决的技术问题在于提供一种蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽及其在降血糖制品中的应用，具有显著的PTP1B抑制活性。

有鉴于此，本发明提供了一种蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽，具有如下氨基酸序列：Gln-Val-His-Gly-Ile-Ser-Pro-Pro-Asp-Ser-Thr-Lys(QVHGISPPDSTK)。

本发明还提供了，编码所述蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽的多核苷酸。

优选的，为海藻来源。

本发明还提供一种蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽的制备方法，包括以下步骤：将极大螺旋藻粉和水混合，搅拌溶胀2-4h，料水比为1:10～1:20，以极大螺旋藻粉加入量0.5-2％的酶底比加入木瓜蛋白酶，酶解条件为：pH值为7-8，温度45-55℃，酶解3-8h后，80-100℃加热灭酶；离心去除沉淀，上清液分别使用Sephadex G-15凝胶柱和Eclipse XDB-C18柱分离，组分冻干得蛋白酪氨酸磷酯酶1B抑制肽，其氨基酸序列为：Gln-Val-His-Gly-Ile-Ser-Pro-Pro-Asp-Ser-Thr-Lys(QVHGISPPDSTK)。